CX3CR1對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞ERK5信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的:
　　 探討CX3CR1對(duì)脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞ERK5信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用，以及CX3CR1/ERK5信號(hào)通路在神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生與維持過程中的作用。
　　 方法:
　　 通過結(jié)扎L5脊神經(jīng)，建立脊神經(jīng)結(jié)扎(SNL)疼痛模型。應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)大鼠脊髓ERK5的活化形式——p-ERK5表達(dá)的改變，應(yīng)用免疫熒光雙標(biāo)確定p-ERK5表達(dá)的細(xì)胞類型。進(jìn)一步結(jié)合反義寡核苷酸技術(shù)，應(yīng)用von Frey纖維絲和熱輻射痛敏檢測(cè)

2、儀，檢測(cè)鞘內(nèi)注射ERK5反義寡核苷酸抑制脊髓ERK5表達(dá)對(duì)SNL大鼠機(jī)械縮足反射閾值(paw withdrawal thresholds，PWT)和熱縮足反射潛伏期(Paw withdrawal latency，PWL)，以確定ERK5在神經(jīng)病理性疼痛中的作用。SNL大鼠鞘內(nèi)注射CX3CR1中和抗體，觀察阻斷該受體對(duì)ERK5活化的影響;鞘內(nèi)注射CX3CR1的配體CX3CL1，觀察CX3CL1能否激活脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞和ERK5，以及抑制ER

3、K5表達(dá)能否逆轉(zhuǎn)CX3CL1的作用，以判定神經(jīng)病理性疼痛條件下CX3CR1對(duì)ERK5的調(diào)節(jié)作用。
　　 結(jié)果:
　　 與假手術(shù)組相比，SNL大鼠術(shù)后脊髓p-ERK5免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞表達(dá)增加(P＜0.05)，熒光雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)p-ERK5主要與小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物Iba1共表達(dá)，表明外周神經(jīng)損傷主要激活脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞ERK5。鞘內(nèi)注射ERK5反義寡核苷酸在有效抑制脊髓ERK5表達(dá)的同時(shí)，緩解了SNL所致的熱與機(jī)械痛敏以及脊髓轉(zhuǎn)錄

4、因子NF-κB的活化（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，阻斷CX3CR1減少了SNL大鼠脊髓ERK5的活化。鞘內(nèi)注射CX3CL1后，大鼠脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞活化明顯增加，PWT與PWL亦明顯降低（P＜0.05），抑制脊髓ERK5的表達(dá)有效地逆轉(zhuǎn)CX3CL1的上述效應(yīng)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)在神經(jīng)病理性疼痛條件下，CX3CL1/CX3CR1通過激活脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞ERK5，調(diào)節(jié)脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞的活化;(2)CX3CR1/ERK5信