酸處理對(duì)老齡大鼠離體再灌注心肌保護(hù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察酸處理對(duì)老齡大鼠離體心臟缺血再灌注后冠脈流量以及pH值的影響；評(píng)價(jià)酸處理對(duì)大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的影響及心肌P13K信號(hào)通路在其中的作用。 方法： 1.酸處理對(duì)老齡大鼠離體心臟缺血再灌注后pH值影響的試驗(yàn)觀察 清潔級(jí)老齡SD大鼠（≥18個(gè)月）24只SD大鼠（≥18個(gè)月），體重450～550 g，隨機(jī)分為缺血再灌注（C）組、缺血后處理（IPO）組和酸處理（H+）組，每組各8只。采用Langendorf

2、f裝置行離體心臟灌注，采用全心停灌30 min后、再灌注中性K-H液（pH值7.4）120 min的方法制備大鼠離體心臟再灌注模型。IPO組于再灌注即刻灌注pH值7.4的K-H液15 s，停灌15 s，重復(fù)6次；H+組于再灌注即刻灌注經(jīng)80％ O2-20％ CO2飽和的酸性K-H液（pH值6.9）3 min。各組處理后改用中性K-H液持續(xù)灌注至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。分別監(jiān)測(cè)各組老齡大鼠冠脈流出液在停灌前、再灌注后3 min、5 min以及8 min

3、的pH值，并觀察停灌前、再灌注后3min、10 min以及30 min冠脈流量（CF）的變化。 2.酸處理對(duì)老齡大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的影響及PI3K信號(hào)通路的作用 清潔級(jí)老齡SD大鼠（≥18個(gè)月）70只，雌雄不限，體重450～550 g，隨機(jī)分為7組（n=10）：隨機(jī)分為7組（n=10）：缺血再灌注組（C組）、缺血后處理組（IPO組）、酸處理組（H+組）、缺血后處理+堿處理組（IPO+OH-組）、堿處理組（OH-組

4、）、酸處理+渥曼青霉素組（H++wort組）和渥曼青霉素組（wort組）。采用Langendorff裝置行離體心臟灌注，采用全心停灌30 min后、再灌注中性K-H液（pH值7.4）120 min的方法制備大鼠離體心臟再灌注模型。IPO組于再灌注即刻灌注pH值7.4的K-H液15 s，停灌15 s，重復(fù)6次；H+組于再灌注即刻灌注經(jīng)80％ O2-20％ CO2飽和的酸性K-H液（pH值6.9）3 min；IPO+ OH-組于再灌注即刻灌

5、注灌注100％ O2飽和的堿性K-H液（pH值7.8）15s，停灌15 s，重復(fù)6次；OH-組于再灌注即刻灌注堿性K-H液灌注3 min；H++wort組于再灌注即刻用灌注含100 nmol/L渥曼青霉素的酸性K-H液3 min；wort組于再灌注即刻灌注含100 nmol/L渥曼青霉素的中性K-H液3 min。各組處理后改用中性K-H液持續(xù)灌注至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。觀察不同時(shí)點(diǎn)：停灌前和再灌注5 min、15 min、30 min血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)

6、，心率（HR）、左室收縮壓（LVSP）、冠脈流量（CF）、左室內(nèi)壓最大上升速率（+dp/dtmax）和左室內(nèi)壓最大下降速率（-dp/dtmax）；于再灌注30min測(cè)定冠狀動(dòng)脈流出液一氧化氮（NO）濃度及心肌組織中一氧化氮合酶（NOS）活性；再灌注120 min后取下心臟用TTC染色，計(jì)算心肌梗塞區(qū)與缺血危險(xiǎn)區(qū)的質(zhì)量比（IS/AAR），反映心肌梗塞面積。 結(jié)果：（1）停灌前三組冠脈流出液的pH值無(wú)明顯差異（P>0.05）；與C組

7、比較，IPO組和H+組再灌注后3 min時(shí)冠脈流出液pH值降低（P<0.05），IPO組和H+組兩兩相比無(wú)明顯差異（P>0.05），三組于再灌注后5min和8min冠脈流出液pH值均無(wú)明顯差異（P>0.05）。與C組比較，IPO組和H+組再灌注后3 min、10 min和30 min時(shí)的冠脈流出液量增加（P<0.05），IPO組和H+組兩兩相比無(wú)明顯差異（P>0.05）。（2）停灌前各組指標(biāo)無(wú)明顯差異，大鼠心臟缺血再灌注后，與C組比較，

8、IPO組和H+組再灌注時(shí)HR、LVSP、CF、±dp/dtmax升高（p<0.05），心肌梗塞面積減少，冠狀動(dòng)脈流出液NO濃度升高，心肌組織NOS含量升高：IPO+OH-組心肌梗塞面積差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），OH-組、H++wort組和wort組心肌梗塞面積增加（P<0.05或0.01），HR、LVSP、CF、±dp/dtmax，冠狀動(dòng)脈流出液NO濃度降低和心肌組織NOS含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；IPO組和h+組兩