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1、目的:探討七氟醚預(yù)處理對(duì)離體大鼠缺血再灌注心肌保護(hù)作用與心肌縫隙連接蛋白43(Connexin43)的關(guān)系。
方法:健康成齡雄性Wistar大鼠32只,體重220~250g,隨機(jī)分為四組(n=8):對(duì)照(C)組、1.2%(S1)、2.4%(S2)、3.6%(S3)七氟醚預(yù)處理組。3%戊巴比妥鈉30 mg/kg腹腔注射麻醉,肝素鈉(500 IU/kg)腹腔注射抗凝后處死大鼠,迅速取出心臟,懸掛至改良Langendorff心灌注裝
2、置。Kreb-Henseleit(K-H)液平衡灌注30min后,全心缺血40min,再灌注60min。S組于缺血前,用預(yù)充相應(yīng)濃度七氟醚的K-H液續(xù)灌15min后,再用K-H液洗脫5min;C組平衡灌注30min后,繼以空白K-H液灌注20min。記錄平衡末、缺血前即刻、再灌注30、再灌注60min時(shí)心功能參數(shù):心率(Heart rate,HR)、左心室形成壓(Left ventriculardeveloped pressure,LV
3、DP)、左室內(nèi)壓上升最大速率(+differential pressuretimemaxium’+dp/dtmax)、左室內(nèi)壓下降最大速率(-differential pressure timemaxium’-dp/dtmax)。再灌注60min時(shí),取部分心尖組織,中性甲醛固定,石蠟包埋切片行HE染色,光鏡下觀察心肌細(xì)胞病理形態(tài)學(xué)改變,另取部分左室組織切片,免疫組化法測(cè)定心肌縫隙連接蛋白43(Connexin43)蛋白分布及表達(dá)水平,用
4、Image-pro Plus6.0圖像分析軟件測(cè)定Connexin43的積分光密度值(integrated opticaldensity,IOD),進(jìn)行定量分析。
結(jié)果:平衡末各組間HR、LVDP、+dp/dtmax及-dp/dtmax無(wú)明顯差異(P>0.05);與C組比較,S組再灌注期心功能改善,HR、LVDP、+dp/dtmax及-dp/dtmax明顯提高,Connexin43蛋白分布均勻,形態(tài)規(guī)則,Connexin43表
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