多藥耐藥蛋白(P170)和多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)在人腦膠質(zhì)瘤耐藥性中的研究及意義.pdf

1、目的：腦膠質(zhì)瘤約占顱內(nèi)腫瘤的40％。由于其呈浸潤性生長，與周圍正常腦組織無明顯邊界，手術(shù)很難做到全切除。因此，腦膠質(zhì)瘤的術(shù)后化療具有極其重要的意義。然而各類腫瘤細(xì)胞對化療藥物產(chǎn)生抗藥性又極大地降低了化療藥物的效果。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥原因極其復(fù)雜，其中多藥耐藥（multidrug iesistance，MDR）中MDR1編碼的P-170蛋白，與多藥耐藥相關(guān)蛋白（multidrug resistance-associated prot

2、ein，MRP）起著重要作用。
　　 P-170糖蛋白是一種能量依賴性藥物排出泵，它有12個跨膜疏水區(qū)和兩個ATP結(jié)合位點(diǎn)，既有與抗癌藥物結(jié)合的位點(diǎn)，也有與ATP結(jié)合的位點(diǎn)。P-170糖蛋白一旦與抗腫瘤藥物結(jié)合，通過ATP提供能量，能使細(xì)胞內(nèi)藥物轉(zhuǎn)出細(xì)胞外，造成細(xì)胞內(nèi)藥物濃度下降，細(xì)胞毒作用降低或完全喪失，細(xì)胞產(chǎn)生耐藥。
　　 MRP與P170在結(jié)構(gòu)和功能上有許多相似之處，也是一種依賴能量的藥泵，屬ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族成

3、員。MRP能識別和轉(zhuǎn)運(yùn)與谷胱甘肽（glutathione，GSH）結(jié)合的底物，將陰離子的共軛物排泄出細(xì)胞，故又稱為GSH-X泵，從而降低細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度，增加藥物外流產(chǎn)生耐藥。
　　 本實驗通過觀察P170和MRP在人腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)，探討P170、MRP表達(dá)與膠質(zhì)瘤級別的關(guān)系，以及P170和MRP在膠質(zhì)瘤耐藥性中的作用與機(jī)制，為膠質(zhì)瘤化療尋找新的途徑。
　　 方法：選取2006-2008年河北醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院神

4、經(jīng)外科初次進(jìn)行手術(shù)治療且術(shù)前未進(jìn)行放療、化療及免疫治療等特殊處置的膠質(zhì)瘤標(biāo)本52例。所有標(biāo)本均經(jīng)組織病理學(xué)檢查，其中膠質(zhì)瘤Ⅰ級8例，Ⅱ級16例，Ⅲ級22例，Ⅳ級6例。另取5例顱腦損傷內(nèi)減壓手術(shù)切除的腦組織標(biāo)本作正常對照。
　　 采用免疫組化SP法檢測P170、MRP在膠質(zhì)瘤標(biāo)本和正常腦組織標(biāo)本中的表達(dá)。
　　 應(yīng)用SPSS14.0統(tǒng)計軟件包，對不同級別P170、MRP結(jié)果用x2檢驗分析；P170與MRP表達(dá)的相關(guān)性采用直

5、線相關(guān)分析，檢驗標(biāo)準(zhǔn)采用P<0.05。
　　 結(jié)果：本實驗通過免疫組化SP法對P170、MRP在52例膠質(zhì)瘤標(biāo)本和5例腦組織標(biāo)本中的表達(dá)進(jìn)行檢測。P170和MRP染色均定位于細(xì)胞漿，呈棕黃色或棕褐色，P170在正常腦組織中無表達(dá)（見Fig.5），而MRP僅有少量表達(dá)（見Fig.10）。1二者在膠質(zhì)瘤標(biāo)本中的表達(dá)均明顯均高于正常腦組織標(biāo)本，并且隨著膠質(zhì)瘤級別的增高表達(dá)的陽性率也增加（見Fig.1-4、Fig.6-9）。
　　

6、 P170的表達(dá)從正常到高級別膠質(zhì)瘤的陽性率分別為0％、25.0％、56.3％、68.2％、100％，各級膠質(zhì)瘤標(biāo)本與正常腦組織比較有顯著性差異（見Table1，P<0.05），而且低級別膠質(zhì)瘤與高級別膠質(zhì)瘤的陽性表達(dá)比較均有顯著差異（見Table2，P<0.05）。
　　 MRP的表達(dá)從正常到高級別膠質(zhì)瘤的陽性率分別為20％、37.5％、62.5％、72.7％、100％，各級膠質(zhì)瘤標(biāo)本與正常腦組織比較有顯著性差異（見Tabl

7、e3，P<0.05），而MRP在Ⅱ級和Ⅲ級膠質(zhì)瘤標(biāo)本中的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；但是，在膠質(zhì)瘤Ⅰ級與膠質(zhì)瘤Ⅱ級和Ⅲ級之間的差異具有顯著性，且在膠質(zhì)瘤Ⅳ級與膠質(zhì)瘤Ⅱ級和Ⅲ級之間的差異具有顯著性，（見Table4，P<0.05）。
　　 對P170和MRP免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，統(tǒng)計結(jié)果顯示二者之間無明顯的相關(guān)性（P>0.05）。
　　 結(jié)論：本實驗通過免疫組化SP法對P170、MRP在52例膠質(zhì)瘤標(biāo)本

8、和5例腦組織標(biāo)本中的表達(dá)進(jìn)行檢測得出以下結(jié)論：
　　 1.P170、MRP在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)明顯高于正常腦組織，且表達(dá)隨著膠質(zhì)瘤級別的增加而增高，在高級別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)明顯高于低級別腦膜瘤中的表達(dá)，說明P170、MRP與膠質(zhì)瘤的惡性增殖程度密切相關(guān)，惡性程度高則其陽性表達(dá)增高。
　　 2.隨著膠質(zhì)瘤惡性程度的程增高，P170、MRP的表達(dá)也相應(yīng)同時增高，但二者之間表達(dá)并無明顯相關(guān)性，說明膠質(zhì)瘤多藥耐藥的產(chǎn)生決非單一因素，而