番茄果實蔗糖磷酸合成酶基因的克隆和番茄遺傳轉化體系的研究.pdf

1、本試驗通過RT-PCR方法，克隆到了番茄果實蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因全長cDNA，在GenBank中的登記號為AY726439。并以自交系T6為材料，對番茄的遺傳轉化體系進行了優(yōu)化，通過農桿菌介導法，將甜瓜果實反義酸性轉化酶基因轉化番茄，得到了卡那霉素抗性苗，具體的研究結果：用異硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步法，提取番茄自交系20-19果實總RNA，與GenBank中登記號為AB051216的番茄蔗糖磷酸合成酶基因高度同源，核苷酸序列的同

2、源性為98﹪。通過番茄遺傳轉化體系的優(yōu)化試驗，確定番茄自交系T6種子消毒方法為先用酒精處理30秒，再用0.7﹪NaCLO(有效氯含量)處理20分鐘，最佳的愈傷組織誘導及不定芽分化培養(yǎng)基為MS+ZT2.0mg/L+IAA0.5mg/L，最佳的生根壯苗培養(yǎng)基為MS+IAA0.5 mg/L，最適合做轉化的外植體為子葉，卡那霉素的最終篩選濃度為50mg/L。采用農桿菌介導法，將甜瓜果實反義酸性轉化酶基因轉化番茄自交系T6，得到了卡那霉素抗性苗。