乙型肝炎病毒相關(guān)性肝纖維化組織的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、目的：采用差異熒光雙向凝膠電泳(DIGE)技術(shù)及質(zhì)譜技術(shù)篩選并鑒定乙型肝炎病毒(HBV)相關(guān)肝纖維化組織差異表達(dá)蛋白質(zhì)，以期獲得肝纖維化早期診斷的分子標(biāo)志物以及潛在的藥物靶標(biāo)，并為肝纖維化的病理發(fā)生機制研究提供思路。 方法：采用DIGE技術(shù)篩選Cy3、Cy5及Cy2熒光素標(biāo)記的肝纖維化及正常肝組織差異表達(dá)蛋白質(zhì)，并用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)或串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行鑒定并分析，對部分有潛在價值的差異表

2、達(dá)蛋白質(zhì)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)從蛋白質(zhì)水平進(jìn)行驗證。 結(jié)果：共篩選出26個差異表達(dá)蛋白質(zhì)點，其中在肝纖維化組織中15個蛋白質(zhì)點上調(diào)，11個蛋白質(zhì)點下調(diào)；上述26個蛋白差異點采用質(zhì)譜技術(shù)成功鑒定出19種蛋白質(zhì)。根據(jù)蛋白質(zhì)功能的不同，這些差異蛋白質(zhì)主要參與氧化應(yīng)激、分子伴侶、細(xì)胞骨架、能量代謝及信號傳導(dǎo)等過程；細(xì)胞角蛋白8、高遷移組蛋白B1、熱休克蛋白70等在HBV相關(guān)肝纖維化組織中高表達(dá)；硫氧還蛋白過氧化物酶、三磷酸腺苷合成酶、神經(jīng)

3、多肽h3等在HBV相關(guān)肝纖維化組織中低表達(dá)。免疫組化驗證結(jié)果表明肝纖維化組織熱休克蛋白70、細(xì)胞角蛋白8、高遷移組蛋白B1表達(dá)水平均高于正常肝組織，且表達(dá)水平隨纖維化程度進(jìn)展而上調(diào)，與蛋白質(zhì)組分析的結(jié)果基本一致。 結(jié)論：蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)是篩選HBV相關(guān)肝纖維化組織差異表達(dá)蛋白質(zhì)有效方法。發(fā)現(xiàn)和鑒定出相關(guān)的蛋白質(zhì)，可能成為潛在藥物靶標(biāo)以及早期診斷、治療的分子標(biāo)志物，同時也為HBV相關(guān)肝纖維化的病理機制研究提供了一個新的研究方法系統(tǒng)。