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文檔簡介
1、目的:研究天蠶素 A-馬蓋寧雜合肽對小鼠小腸黏膜免疫功能的影響并探討其作用機制。
方法:表達天蠶素A-馬蓋寧雜合肽混合檢測蛋白質濃度;取18只SPF級雌性、6周齡、體重相近的BALB/c小鼠隨機分組:空白組(0.9%生理鹽水0.75mL)、低劑量雜合肽組(1/2原液蛋白質濃度雜合肽0.75mL)、高劑量雜合肽組(原液蛋白質濃度雜合肽0.75mL)灌胃六周。于灌胃開始前后記錄空腹體重并計算平均日增重; HE染色觀察小腸黏膜形態(tài);
2、平板計數測定盲腸內容物腸道菌群;BrdU摻入法檢測Peyer’s patches處 T、B淋巴細胞的增殖能力;免疫組化測定小腸黏膜內 IgA的陽性表達量; ELISA測定小腸組織勻漿液中IL-2、IFN-γ和IL-4的含量以及IFN–γ/IL-4;Real-time PCR檢測小腸組織NF-КB mRNA水平及ELISA測定小腸組織勻漿液內NF-КB蛋白的表達量。
結果:天蠶素A-馬蓋寧雜合肽有明顯抑菌活性,混合后蛋白質濃度為
3、0.52 mg/mL;灌胃6周后,雜合肽組小鼠體重顯著大于空白組(P<0.05);十二指腸絨毛長度顯著大于空白組(P<0.05);各段小腸隱窩深度均明顯低于空白組(P<0.05)且V/C均明顯高于空白組(P<0.05);雜合肽組盲腸內容物中大腸桿菌數量顯著低于空白組(P<0.05),雙歧桿菌與乳酸桿菌數量顯著高于空白組(P<0.05)且有劑量依賴性;雜合肽組小腸集合淋巴結內CD3+T細胞中CD3+BrdU+細胞百分率及B220+B細胞中
4、B220+BrdU+細胞百分率均顯著高于空白組(P<0.05);雜合肽組小腸黏膜內IgA及IL-2、IFN-γ和IL-4的陽性表達水平均顯著升高(P<0.05),IFN-γ/IL-4差異不顯著(P<0.05);小腸組織中NF-КB mRNA水平及蛋白表達量均顯著高于空白組(P<0.05)。
結論:天蠶素 A-馬蓋寧雜合肽雜合肽灌胃6周后可提高小鼠的體重及小腸黏膜免疫水平。機制是有效改善小腸黏膜結構促進營養(yǎng)物質的消化吸收;顯著降
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