DATS通過Src-Gab1-Shp2信號(hào)途徑激活人白血病HL-60細(xì)胞NADPH氧化酶.pdf

1、目的：探討二烯丙基三硫(diallyl trisulfide，DATS)誘導(dǎo)人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞NADPH氧化酶活化的機(jī)制。
　　方法：細(xì)胞用濃度為150μM的DATS處理或用Src激酶抑制劑預(yù)處理30min后再用DATS處理HL-60細(xì)胞0、5、15、30、60、180min，蛋白印跡法檢測(cè)Src、Gab1和Shp2的磷酸化水平，NBT比色還原實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HL-60細(xì)胞NADPH氧化酶的活性。
　　結(jié)果：DATS可誘導(dǎo)

2、Src激酶磷酸化，在5-15min磷酸化顯著增強(qiáng)（P＜0.05），30min后幾乎回復(fù)到基態(tài)水平，并激活HL-60細(xì)胞NADPH氧化酶；Src激酶特異性抑制劑PP2可降低Src激酶的磷酸化，并顯著抑制DATS誘導(dǎo)的HL-60細(xì)胞NADPH氧化酶的活性（P<0.05）。DATS可誘導(dǎo)Gab1磷酸化增強(qiáng)并持續(xù)到整個(gè)實(shí)驗(yàn)時(shí)間（P＜0.05），其中以5、15、30min時(shí)，Gab1磷酸化水平升高最明顯。與此同時(shí)，DATS可誘導(dǎo)Shp2磷酸化增強(qiáng)