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文檔簡介
1、目的:探討肝X受體(Liver X ReceptorS,LXRs)對肝臟脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,F(xiàn)AS)表達(dá)的影響及機制。 方法:分別以糖尿病db/db小鼠和對照的db/m小鼠予以LXR激動劑T0901317(3mg/kg/day)灌胃處理7天,T0901317(10μl)刺激人肝癌細(xì)、胞系(HepG2細(xì)胞)24h,LXR或SREBP-1c表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞12h,分別采用免疫組織化學(xué)、實時
2、熒光定量PCR、蛋白印跡、轉(zhuǎn)染熒光素酶報告基因等方法,檢測FAS和固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(sterolregulatory element-binding protein-1,SREBP-1)的表達(dá)水平及LXR激動劑T0901317對其影響。 結(jié)果:免疫組化結(jié)果顯示FAS蛋白在肝臟廣泛表達(dá),主要位于肝細(xì)胞胞漿內(nèi),在中央靜脈周圍及匯管區(qū)表達(dá)更明顯;同對照組db/m小鼠相比,db/db小鼠肝臟FAS表達(dá)量在mRNA水平和蛋白水平均明顯
3、增高(mRNA水平約為2.3倍,p<0.05);T0901317可顯著降低db/db小鼠空腹血糖水平(12.000±1.061 mmol/L下降到7.733±0.6873mmol/Lp<0.01)和糖化血紅蛋白水平(由5.667±0.095﹪下降到4.867±0.084﹪p<0.001);T0901317處理可使db/m小鼠肝臟FAS的mRNA表達(dá)升高約3.5倍(p<0.05),db/db小鼠肝臟FAS的mRNA表達(dá)升高約1.7倍(P<
4、0.05):db/m小鼠肝臟SREBP-1的mRNA升高約2.4倍(p<0.05),db/db小鼠肝臟SREBP-1的mRNA升高約2.1倍(p<0.01);進(jìn)一步研究其上調(diào)機制,發(fā)現(xiàn)T0901317也能上調(diào)HepG2細(xì)胞FAS的mRNA表達(dá)水平,升高約1.9倍(p<0.05):不僅如此,LXR的激活還能增加HepG2細(xì)胞中FAS基因啟動子活性,過表達(dá)LXR或SREBP-1c也能增加HepG2細(xì)胞FAS基因啟動子活性(p<0.001)。
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