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文檔簡介
1、分類號:Q窆3魚密級:公玨單位代碼:學(xué)號:100862010128斯奈克氏菌AUH—JLC159及其在5一羥基雌馬酚生物合成中的應(yīng)用IsolationandapplicationofanewlyisolatedintestinalbacteriumslackiaspAUHJLC159forthebiosynthesisof5hydroxyequol一,一學(xué)位申請人:劉子光指導(dǎo)教師:王秀伶教授學(xué)科專業(yè):微生物與生化藥學(xué)學(xué)位類別:理學(xué)碩士授
2、予單位:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期:二。一三年五月二十七日摘要大豆異黃酮(soyisoflavones)是大豆在其生長過程中形成的一類次生代謝產(chǎn)物,主要以結(jié)合型糖苷存在,以游離型苷元存在的大豆異黃酮只有3種,即黃豆苷原(Daidzein)、染料木素(Genistein)和黃豆黃素(Glycitein)。研究表明,被攝入機(jī)體的大豆異黃酮可被胃腸道微生物菌群降解為二氫黃豆苷原、四氫黃豆苷原、二氫染料木素、去氧甲基安哥拉紫檀素、雌馬酚、4一乙基苯酚
3、等不同代謝產(chǎn)物。本實(shí)驗(yàn)從公雞新鮮糞樣中分離得到一株對大豆異黃酮染料木素具有轉(zhuǎn)化能力的革蘭氏陽性嚴(yán)格厭氧細(xì)菌菌株,我們將其命名為AUHJLCl59,經(jīng)16SrDNA序列比對,發(fā)現(xiàn)該菌株AUHJLCl59與Slackiapiriformis和Slackiafaecicanis的相似性最高,相似性為92%,因而,將AUHJLCl59初步鑒定為斯奈克氏茵屬的一個新分類單元,即菌株SlackiaspstrainAUHJLC159。經(jīng)紫外吸收光譜、
4、質(zhì)譜、核磁共振氫譜和碳譜等分析結(jié)果,將菌株AUHJLCl59轉(zhuǎn)化染料木素后生成的產(chǎn)物鑒定為5羥基雌馬酚。由于代謝產(chǎn)物5羥基雌馬酚的第三個碳原子為手性碳原子,故進(jìn)一步對產(chǎn)物5羥基雌馬酚的手征特性進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),產(chǎn)物5羥基雌馬酚為單一對映異構(gòu)體,即該轉(zhuǎn)化菌株轉(zhuǎn)化染料木素后生成的5一羥基雌馬酚的對映體過量率為100%;經(jīng)旋光性測定,發(fā)現(xiàn)該代謝產(chǎn)物為左旋,旋光度為610。菌株AUHJLCl59對底物染料木素最佳轉(zhuǎn)化時間為2~3天,最大濃度
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