23246.kruppel樣因子4(klf4)在小鼠表皮干細(xì)胞中的表達(dá)和功能研究

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文Kruppel樣因子4(KLF4)在小鼠表皮干細(xì)胞中的表達(dá)和功能研究姓名：李娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：干細(xì)胞指導(dǎo)教師：黃士昂201105華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文4[關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞]KLF4；表皮干細(xì)胞；細(xì)胞表面標(biāo)志；標(biāo)記滯留；世系追蹤第二部分第二部分KLF4在小鼠表皮干細(xì)胞中的功能研究在小鼠表皮干細(xì)胞中的功能研究目的：目的：檢測(cè)KLF4在小鼠表皮干細(xì)胞中的功能。方法：方法：建立他莫昔芬誘導(dǎo)的KLF4基因敲除小鼠模型

2、，在成年小鼠腹腔內(nèi)注射他莫昔芬誘導(dǎo)KLF4基因敲除。使用免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)KLF4敲除后小鼠皮膚組織的結(jié)構(gòu)變化。分離純化小鼠表皮細(xì)胞，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)并比較野生小鼠與基因敲除組中毛囊隆突部干細(xì)胞（CD34CD49f細(xì)胞）和IFE干細(xì)胞（Sca1CD49f細(xì)胞）數(shù)量。通過(guò)體外克隆形成實(shí)驗(yàn)，比較野生小鼠與基因敲除組中表皮細(xì)胞體外克隆形成能力，并使用免疫熒光激活細(xì)胞分選術(shù)（F）分離兩組表皮細(xì)胞中的CD34CD49f細(xì)胞，比較其體外克隆

3、形成能力。結(jié)果：結(jié)果：與對(duì)照野生小鼠相比，KLF4敲除小鼠的表皮組織內(nèi)毛囊顯著增生，基底細(xì)胞從單層增殖為多層。KLF4小鼠表皮細(xì)胞中CD34CD49f毛囊干細(xì)胞和Sca1CD49fIFE干細(xì)胞的比例分別為12.8%和68.73%，而KLF4小鼠表皮細(xì)胞中干細(xì)胞的比例分別降至6.26%和52.6%。體外克隆形成實(shí)驗(yàn)顯示KLF4敲除后表皮細(xì)胞體外形成的克隆數(shù)目從22下降至9。此外，KLF4小鼠表皮CD34CD49f細(xì)胞體外能形成33個(gè)克隆，

4、但是在KLF4小鼠中這一數(shù)目降至15。結(jié)論：結(jié)論：KLF4敲除后表皮干細(xì)胞的數(shù)目減少，其自我更新能力下降，因此KLF4在表皮干細(xì)胞的維持中發(fā)揮著重要的角色。[關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞]表皮干細(xì)胞；KLF4基因敲除；增生；自我更新；克隆形成第三部分第三部分小鼠皮膚急性創(chuàng)傷愈合過(guò)程中表達(dá)小鼠皮膚急性創(chuàng)傷愈合過(guò)程中表達(dá)KLF4的表皮干細(xì)胞的表皮干細(xì)胞的作用的作用目的：目的：研究表達(dá)KLF4的表皮干細(xì)胞對(duì)小鼠皮膚急性創(chuàng)傷愈合的作用。方法：方法：利用KLF4