2647.微擬球藻多不飽和脂肪酸合成途徑及去飽和酶功能的研究

1、暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文題名(中英對(duì)照)：微擬球藻多不飽和脂肪酸合成途徑及去飽和酶功能的研究ResearchinPolyunsaturatedFattyAcidSynthesisPathwayDesaturaseinNannochlopsisoceanica作者姓名：劉婉君指導(dǎo)教師姓名:李宏業(yè)學(xué)位、職稱：博士，教授學(xué)科、專業(yè)名稱：細(xì)胞生物學(xué)論文提交日期：論文答辯日期：2016年6月6日答辯委員會(huì)主席：欒天罡暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文微擬球藻多不飽

2、和脂肪酸合成途徑及去飽和酶的功能研究II摘要摘要微擬球藻具有生長速度快、脂質(zhì)含量高及培養(yǎng)成本較低等特點(diǎn)。近年來，一些產(chǎn)油量豐富的微擬球藻藻株已投入工業(yè)化規(guī)模培養(yǎng)，建立起成熟的規(guī)?；忾]式光生物反應(yīng)器和開放池等的戶外培養(yǎng)體系。微擬球藻除了被認(rèn)為是生物柴油生產(chǎn)的理想原料外，其胞內(nèi)還能累積一些有益健康的活性物質(zhì)，如類胡蘿卜素和多不飽和脂肪酸等，被認(rèn)為是生產(chǎn)多不飽和脂肪酸的重要原料之一，如何提高微擬球藻多不飽和脂肪酸的生產(chǎn)效率已成為研究熱點(diǎn)。隨

3、著高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，一些微擬球藻藻株的全基因組序列已經(jīng)測(cè)序完成，但全基因組序列尚未公布，且很多基因缺乏注釋，對(duì)研究其代謝途徑帶來了一定的困難。本研究首先通過RNAseq對(duì)微擬球藻培養(yǎng)周期的轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行了分析，推測(cè)出微擬球藻的多不飽和脂肪酸代謝途徑，為研究微擬球藻高產(chǎn)多不飽和脂肪酸及構(gòu)建工程微藻提供了基礎(chǔ)。通過分子生物學(xué)手段構(gòu)建了微擬球藻的遺傳轉(zhuǎn)化表達(dá)載體，通過電擊轉(zhuǎn)化，成功得到Δ6去飽和酶基因過表達(dá)轉(zhuǎn)化藻株NoD6，Δ5去飽和酶外源基

4、因轉(zhuǎn)化藻株P(guān)tD5b，Δ5去飽和酶和Δ6去飽和酶外源基因轉(zhuǎn)化藻株P(guān)tD5bD6。通過對(duì)這3種轉(zhuǎn)化藻藻株的生理生化分析，與野生型相比，發(fā)現(xiàn)3種轉(zhuǎn)化藻株的生長速率沒有變化，光合作用效率有輕微改變，而中性脂含量均顯著增加。對(duì)比不同脂肪酸組成的變化發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)化藻株的不飽和脂肪酸，尤其是多不飽和脂肪酸的含量有不同程度的提高。結(jié)果表明脂肪酸合成途徑潛在關(guān)鍵基因D6、D5b去飽和酶均具有促進(jìn)脂質(zhì)合成以及多不飽和脂肪酸合成的重要功能。研究結(jié)果初步闡明了微