AtMGT4基因在水稻中異位表達的初步研究.pdf

1、分類號學校代碼AtMGT4基因在水稻中異位表達的初步研究PreliminaryStudiesonEctopicExpressionofAtMGT4inRice研究生姓名指導教師姓名、職稱學科專業(yè)研究方向湖南師范大學學位評定委員會辦公室2012年4月摘要IUllIIIIIIIIIIIIIIIIIl＼2148864擬南芥鎂離子轉運家族成員(AtMGTs)在鎂離子的吸收和轉運中發(fā)揮著重要作用，而AtMGT4是其中的一員。實驗室前期的研究發(fā)現(xiàn)，

2、擬南芥過表達AtMGT4植株會產(chǎn)生種子增大的表型。種子大小(千粒重)是糧食作物的重要農(nóng)藝性狀之一。在不明顯改變水稻其他農(nóng)藝性狀的情況下，通過遺傳改良的手段提高千粒重，對于增加糧食的產(chǎn)量，增強糧食安全能力有著重要的意義。本研究利用農(nóng)桿菌轉化方法，把Ubi：：AtMGT4基因導入中花11水稻，并對轉基因植株性狀進行了初步分析。利用基因克隆技術進行AtMGT4的克隆和過表達載體的構建，由于所使用的植物表達載體中帶有一個肉眼可見的報告基因AsR

3、ed，使得轉基因的愈傷組織能夠在篩選階段呈現(xiàn)粉紅色，易于在早期辨別出轉基因的愈傷組織，對統(tǒng)計轉化率起到了重要作用。通過根瘤農(nóng)桿菌的介導，侵染水稻成熟胚誘導的愈傷組織，獲得了中花11轉基因植株。為提高水稻轉基因轉化效率，比較了EHAl05和Agl0兩種根瘤農(nóng)桿菌菌種侵染中花11愈傷組織的轉化率，也比較了使用AAM培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基作為兩種不同的侵染液的轉化率，實驗結果表明，使用根瘤農(nóng)桿菌EHAl05和AAM作為侵染液，效果較好。對轉基因植