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文檔簡介
1、凡納濱對蝦作為我國重要的對蝦養(yǎng)殖品種,在我國對蝦產(chǎn)業(yè)中扮演著重要角色,但隨著其養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,對蝦的孵化率和幼體成活率降低、抗病能力減弱、病害嚴(yán)重等問題日益凸顯出來。利用現(xiàn)代遺傳育種手段培育出具有優(yōu)良經(jīng)濟(jì)性狀的養(yǎng)殖品種是解決上述問題的有效途徑,目前迫切需要進(jìn)行對蝦生長性狀的分子機(jī)理的研究。
本研究以凡納濱對蝦肌肉組織為材料,構(gòu)建了一個肌肉組織全長cDNA文庫,并隨機(jī)選取72個克隆進(jìn)行測序了分析。對文庫質(zhì)量結(jié)果分析,文庫初始庫
2、容為8.50×106 cfu,插入片段在500~4000 bp之間,大部分片段在1000 bp以上。對隨機(jī)選取的72個克隆送交測序,整理分析得到37條已有功能注釋的基因序列和18條未知蛋白的核苷酸序列。
另外本實(shí)驗(yàn)將由已構(gòu)建的差減cDNA文庫中獲得的兩個生長相關(guān)基因肌球蛋白輕鏈基因MLC和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜轉(zhuǎn)運(yùn)通道蛋白基因SEC61γ的兩條片段序列,通過對己構(gòu)建的全長文庫進(jìn)行目的基因的篩選獲得了上述兩個基因的全長序列。凡納濱對蝦ML
3、C基因的cDNA全長序列包含一個462 bp的開放閱讀框,推測其編碼的蛋白質(zhì)含有153個氨基酸,預(yù)測其分子量為17.5 ku,等電點(diǎn)為4.67。運(yùn)用熒光定量PCR的方法對MLC基因在凡納濱對蝦中表達(dá)情況進(jìn)行研究,結(jié)果表明MLC基因在凡納濱對蝦的肌肉、心臟、眼柄等8個組織或器官中都有表達(dá),其中在肌肉組織中表達(dá)量最高,而最低表達(dá)量是肝胰腺中;不同生長期肌肉組織中,表達(dá)量最高是45 d日齡的對蝦,表達(dá)量最低是10d日齡。
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