PCV2對體外培養(yǎng)仔豬淋巴細胞TLR的影響.pdf

1、PCV2是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)的主要病原。自1991年在加拿大首次報道以來，在世界各地已廣泛傳播，給世界的養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。PCV2感染后，可引起仔豬固有免疫和適應性免疫的障礙，導致嚴重的免疫抑制。TLR是近年來回有免疫研究最重要的進展，可識別一種或多種特定病原相關分子模式(PAMP)，啟動針對入侵病原體的早期應答，引起炎性細胞因子的表達，誘發(fā)獲得性免疫反應，是連接機體固有免疫和適應性免疫的橋梁。淋巴細胞是機體

2、重要的免疫細胞，也是PCV2作用的主要靶細胞，我們前期的研究已經(jīng)證實，PCV2可引起仔豬淋巴細胞促炎和抗炎細胞因子表達和分泌的紊亂，那么這與淋巴細胞的TLR之間存在何種關系？有哪些TLR參與PCV2引起機體的免疫抑制過程？基于此，本試驗探討PCV2感染對體外培養(yǎng)仔豬淋巴細胞TLR的影響，從而為臨床上圓環(huán)病毒病(PCVD)的防治提供理論基礎。
　　 6頭經(jīng)ELISA和熒光定量PCR方法檢測PCV2和PRRSV血清抗體和抗原均為陰性

3、的30日齡斷奶仔豬，體外培養(yǎng)脾臟細胞，分為對照組和PCV2感染組，分別在培養(yǎng)后0、6、12、24和48 h收集懸浮的淋巴細胞。間接免疫熒光定位檢測PCV2感染淋巴細胞的情況;提取淋巴細胞的總RNA，采用實時熒光定量PCR的方法檢測TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8和TLR9 mRNA表達量的變化。結果表明，TLR2 mRNA的表達量在攻毒后12、24和48 h時，均極顯著高于對照組(P＜0.01); TLR3 mRNA的表

4、達量在攻毒后24和48 h時均極顯著高于對照組(P＜0.01); TLR4 mRNA的表達量在攻毒后24 h時極顯著高于對照組(P＜0.01);在48h時，顯著高于對照組(P＜0.05); TLR7和TLR8 mRNA表達量各個時間點與對照組相比，差異均不顯著(P＞0.05); TLR9 mRNA的表達量在攻毒后12、24和48 h時，均極顯著高于對照組(P＜0.01)。結果表明，PCV2可顯著影響體外培養(yǎng)仔豬淋巴細胞TLR2、TLR3

5、、TLR4和TLR9 mRNA的表達，而對TLR7和TLR8mRNA表達的影響不明顯。
　　 6頭經(jīng)ELISA和熒光定量PCR方法檢測PCV2和PRRSV血清抗體和抗原均為陰性的30日齡斷奶仔豬，體外培養(yǎng)脾臟細胞，分為對照組和PCV2感染組，分別在培養(yǎng)后0、6、12、24和48h收集懸浮的淋巴細胞。提取淋巴細胞的總蛋白，Western blot定量檢測TLR3和TLR4蛋白含量的變化。結果，PCV2感染后6和12 h，淋巴細胞中