菊花‘日本黃’與‘神馬’葉盤再生及轉基因初步研究.pdf

1、菊花(Dendranthema×grandiflora)是菊科菊屬的多年生草本植物，在我國有1600年的栽培歷史。本論文以切花菊品種‘日本黃’和‘神馬’為試驗材料，進行了繼代組織培養(yǎng)、葉盤再生體系建立、玻璃化苗的生理生化特性、玻璃化現象的控制、遺傳轉化體系的建立等5個方面的研究。主要結論如下： 1.以‘日本黃’的莖段為外植體進行繼代培養(yǎng)，最佳繼代培養(yǎng)基為MS+6-BA0.3 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+瓊

2、脂7.5 g/L，增殖倍數為5.30。以品種‘神馬’的莖段為外植體進行繼代培養(yǎng)，最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7.5 g/L，增殖倍數為5.33。 2.把‘日本黃’葉片切成0.8 cm×0.8 cm的葉盤，以葉盤為外植體進行再生體系的建立，培養(yǎng)基最佳配方為：MS+6-BA2 mg/L+NAA0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7.5 g/L，再生頻率為35.0％。把

3、‘神馬’菊花葉片切成0.8 cm×0.8 cm的葉盤，進行再生體系的建立，再生培養(yǎng)基配方為MS+6-BA2 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7.5g/L，再生頻率為61.7％。 3.通過對‘日本黃’玻璃化苗和正常苗生理生化方面的比較研究，發(fā)現菊花玻璃化苗的組織含水量、可溶性糖含量高于正常苗，葉綠素a、葉綠素b、蔗糖、可溶性蛋白含量明顯低于正常苗。研究結果表明玻璃化苗出現了水分代謝不暢、蛋白質合成受阻、蔗糖的

4、吸收與運輸異常的現象。 4.以瓊脂含量、蔗糖含量、活性炭含量、封口材料為因素設計正交試驗，對‘日本黃’的玻璃化進行控制研究。結果表明：瓊脂濃度、蔗糖濃度、活性炭含量對‘日本黃’的增殖、玻璃化率的降低有顯著影響；帶有濾孔的封口膜可以顯著降低‘日本黃’試管苗的玻璃化率，對‘日本黃’的增殖沒有顯著影響。‘日本黃’玻璃化控制的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.1 mg/L+瓊脂10 g/L+蔗糖35 g/L+活性炭1