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1、為探討雞腸道內(nèi)抗菌肽表達(dá)量晝夜變化規(guī)律,本研究采用免疫組織化學(xué)技術(shù)研究了兩周齡羅曼褐雞的腸道抗菌肽表達(dá)量的動(dòng)態(tài)變化情況。試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果如下: 1日齡雛雞自由采食一周后對(duì)雛雞的光照進(jìn)行嚴(yán)格地控制,具體做法是早上8:00準(zhǔn)時(shí)給予光照,晚上8:00除去光照,以保證機(jī)體形成正常的生物鐘。兩周齡時(shí)開(kāi)始取材,在一天24小時(shí)內(nèi),分8個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別為8:00、11:00、14:00、17:00、20:00、23:00、次日2:00、次日5:00取
2、材,次日8:00重復(fù)取材一次,共需9次取材。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)從雞群中隨機(jī)取5只,乙醚麻醉后取出各段腸道,福爾馬林固定。腸道組織按常規(guī)方法制做石蠟切片,免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行腸段內(nèi)抗菌肽表達(dá)量的檢測(cè),采用Leica顯微圖像處理系統(tǒng)及QWln軟件拍照并統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性物質(zhì)所占面積比。 結(jié)果顯示:抗菌肽在雞腸道各段內(nèi)的表達(dá)量的晝夜變化總體呈一定的規(guī)律性,從早上到第二天早上呈現(xiàn)先下降再升高再下降的趨勢(shì)。早晨8:00時(shí)抗菌肽的表達(dá)量處于中等水平,上午腸道
3、各段抗菌肽總的表達(dá)水平趨于下降,在14:00和17:00時(shí)抗菌肽的表達(dá)量會(huì)處在一個(gè)較低的水平,到晚上8:00時(shí)抗菌肽表達(dá)量開(kāi)始有所回升,其表達(dá)量的水平近乎于早上8:00時(shí)的水平,23:00時(shí)表達(dá)量繼續(xù)上升,在凌晨2:00和5:00時(shí)抗菌肽表達(dá)量維持在一個(gè)較高的水平,到8:00時(shí)又回落到起初的水平。另外,十二指腸的前、中、后三段同一時(shí)間點(diǎn)抗菌肽的表達(dá)水平有所差異,但是十二指腸前、中、后三段內(nèi)抗菌肽表達(dá)量在不同時(shí)間點(diǎn)的變化趨勢(shì)是一致的??漳c
4、、卵黃蒂和直腸處的抗菌肽不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量變化與整體的變化趨勢(shì)有所不同,主要體現(xiàn)在開(kāi)始時(shí)的幾個(gè)時(shí)間點(diǎn),并不同于其他腸段的開(kāi)始走勢(shì),先呈現(xiàn)些許上升的趨勢(shì),但是在白天的時(shí)間里抗菌肽在這三段腸道的表達(dá)量仍然處于相對(duì)較低的水平,在凌晨2:00和5:00時(shí)其抗菌肽表達(dá)量達(dá)到一天內(nèi)的最高水平,這一點(diǎn)與其他各段腸道內(nèi)的抗菌肽表達(dá)量變化趨勢(shì)相近。回腸和盲腸內(nèi)的抗菌肽表達(dá)量變化與十二指腸的變化趨勢(shì)相同。從整體上看,回腸內(nèi)的抗菌肽表達(dá)量的平均水平要高于其他
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