實驗9高溫對植物細胞膜的傷害

1、1. 實驗?zāi)康?■ 學(xué)習(xí)電導(dǎo)儀法測定膜相對透性的方法■ 理解逆境對植物膜透性的影響,植物細胞膜起調(diào)節(jié)控制細胞內(nèi)外物質(zhì)交換的作用，它的選擇透性是其最重要的功能之一。當植物受到逆境影響時，如高溫或低溫，干旱、鹽漬、病原菌侵染后，細胞膜遭到破壞，膜的透性增加，選擇透性喪失，細胞內(nèi)部分電解質(zhì)外滲，將植物組織浸入去離子水中，水的電導(dǎo)將因電解質(zhì)的外滲而加大，傷害愈重，外滲愈多，電導(dǎo)率愈大。膜結(jié)構(gòu)破壞的程度與逆境的強度、持續(xù)的時間、作物品種的抗

2、性等因素有關(guān)。因此，質(zhì)膜透性的測定?？勺鳛槟婢硞Φ囊粋€生理指標，廣泛應(yīng)用在植物抗性生理研究中。本實驗采用電導(dǎo)率法測定電解質(zhì)的相對外滲率，來了解脅迫情況下植物受害的程度。,2. 實驗原理,當質(zhì)膜的選擇透性被破壞時細胞內(nèi)電解質(zhì)外滲，其中包括鹽類、有機酸等，這些物質(zhì)進入環(huán)境介質(zhì)中，如果環(huán)境介質(zhì)是蒸餾水，那么這些物質(zhì)的外滲會使蒸餾水的導(dǎo)電性增加，表現(xiàn)在電導(dǎo)率的增加上。植物受傷害愈嚴重，外滲的物質(zhì)越多，介質(zhì)導(dǎo)電性也就越強，測得的電導(dǎo)率就越高（

3、不同抗性品種就會顯示出抗性上的差異。）本實驗采用電導(dǎo)率法測定電解質(zhì)的相對外滲率，來了解脅迫情況下植物受害的程度。,傷害率,本次實驗測定高溫對植物細胞膜的傷害電導(dǎo)率 K=GQQ:電極常數(shù)（電導(dǎo)儀本身決定）G:實測電導(dǎo)值傷害率（％）＝,3 材料、儀器設(shè)備及試劑,（一）材料：梧桐葉片；（二）儀器設(shè)備： 1. 電導(dǎo)儀；2.打孔器；3. 真空干燥器； 4. 恒溫水浴鍋；,4 實驗步驟,1) 打取葉圓片：自選葉片，洗凈

4、吸干，避開葉脈打取30個葉圓片, 放入1支試管, 再打取30個葉圓片,放入另1支試管, 依此類推, 每支試管皆放入30個葉圓片；2) 試管分別編號為：1A,1B, 2A,2B ……5A,5B，每管加入15ml純水, 抽真空20min；3) 水浴處理：5組(1A1B,2A2B ……5A5B)分別在60℃水浴0，10，20，30，40min，取出后用自來水冷卻10分鐘；,4) 測量電導(dǎo)率：用電導(dǎo)儀測定浸泡溶液的電導(dǎo)率（分組單獨領(lǐng)取電導(dǎo)儀

5、，詳細使用方法分組指導(dǎo)）；5) 煮沸電導(dǎo)率：測過電導(dǎo)率的10支試管再放入100℃沸水浴中15min，以殺死植物細胞，使細胞內(nèi)物質(zhì)全部滲漏出來，取出試管后用自來水冷卻10min，測其煮沸電導(dǎo)率。,電導(dǎo)儀的使用方法,電源開關(guān)“開”，預(yù)熱；打開（測量/校正）撥至“測量”；（補償/一般）撥至“一般”；（×1/×10-2）撥至“×1”；量程范圍選“×103”，使待測值介于0.1～0.999之間。每次

6、往待測液中插入電極時，都要首先用純水沖洗電極，并用吸水紙輕輕拭干。,5 數(shù)據(jù)記錄與處理,表1 高溫對葉片傷害率的影響,6 實驗結(jié)果及分析,計算電導(dǎo)率時，取2支試管的平均值計算傷害率比較不同時間處理的葉片細胞透性的變化情況，記錄結(jié)果，并加以解釋以傷害率同處理時間的關(guān)系作圖,精品課件！,精品課件！,7 注意事項,整個過程中，葉片接觸的用具必須絕對潔凈（全部器皿要洗凈），也不要用手直接接觸葉片，以免污染； 水浴加熱隔幾分鐘搖一次