水環(huán)境中吲哚美辛的酶聯(lián)免疫吸附分析方法的建立.pdf

1、本文成功建立了一種高靈敏度和高特異性的間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)，用以分析不同水環(huán)境(自來(lái)水，飲用水，地表水以及污水)中的吲哚美辛含量。 吲哚美辛是一種常用的非甾體抗炎鎮(zhèn)痛藥(NSAID)。將吲哚美辛與牛血清白蛋白和卵清蛋白相結(jié)合制成免疫原和包被抗原。使用免疫原對(duì)兩只成年新2西蘭大白兔進(jìn)行5次免疫后取得吲哚美辛抗血清，以靈敏度，特異性，精密度，準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性作為標(biāo)準(zhǔn)篩選出最佳抗體。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，標(biāo)準(zhǔn)曲線建立在

2、0.01-10ng/mL(0.01，0.03，0.1，0.3，1.0，3.0，10 ng/mL)的濃度范圍內(nèi)。在兩周時(shí)間內(nèi)連續(xù)作出10條標(biāo)準(zhǔn)曲線，IC<,50>值(標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度抑制至最大吸光度值的50％時(shí)所對(duì)應(yīng)的待測(cè)物濃度)在0-10-0.25 ng/mL，最低檢出限(DL，S/N=3)為0.01 ng/mL。ELISA法的特異性由交叉反應(yīng)表示，在所測(cè)物質(zhì)中，作為吲哚美辛的一種前體藥物，阿西美辛與吲哚美辛結(jié)構(gòu)相似，因此它與吲哚美辛抗