雞肌肉組織中氯霉素殘留的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法研究.pdf

1、該研究采用活化酯法制備氯霉素(Chloranmphenicol,CAP)免疫抗原,分別免疫家兔和Balb/c小鼠獲得抗CAP抗血清,并用間接酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法(ELISA)對(duì)抗血清效價(jià)進(jìn)行了檢測(cè),分別建立了檢測(cè)CAP殘留的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,可用于檢測(cè)雞肌肉組織中CAP的殘留量.CAP免疫抗原(CAP-BSA)的偶聯(lián)比率為8:1,包被抗原(CAP-OA)的偶聯(lián)比率為2:1.在以多克隆抗體建立的ELISA方法中,用方陣滴定法確定包被抗

2、原最適包被濃度為1.7 μ g/ml,抗血清最高效價(jià)為1:640000,抗血清純化后最適工作濃度為1:20000.采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法建立檢測(cè)CAP的標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性檢測(cè)范圍為0.1ng/ml~36.45ng/ml,檢測(cè)限為0.05ng/ml.以0.5、1、2.5、5ng/g的濃度添加時(shí),雞肌肉組織中的回收率為42.00﹪~92.80﹪,變異系數(shù)為4.76﹪~26.29﹪.在以單克隆抗體建立的ELISA方法中,用方陣滴定法確定包被抗原

3、最適包被濃度為0.85 μg/ml,腹水最高效價(jià)為1:108,純化后最適工作濃度為1:10000.采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法建立檢測(cè)CAP的標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性檢測(cè)范圍為0.1ng/ml~25ng/ml,檢測(cè)限為0.1ng/g.以0.5、1、2.5、5ng/g的濃度添加時(shí),雞肌肉組織中回收率為71.01﹪~127.86﹪,變異系數(shù)為2.68﹪~16.16﹪.上述2種ELISA方法快速、靈敏、方便,滿足了氯霉素殘留檢測(cè)的要求,適用于殘留大規(guī)模的快