1.家蠶蛹蟲草特性研究2.家蠶生物反應器表達hgmcsf產(chǎn)業(yè)化研究3.關(guān)于桿狀病毒基因的結(jié)構(gòu)與功能研究

1、浙江大學博士后學位論文1.家蠶蛹蟲草特性研究2.家蠶生物反應器表達hGM-CSF產(chǎn)業(yè)化研究3.關(guān)于桿狀病毒基因的結(jié)構(gòu)與功能研究姓名：貢成良申請學位級別：博士后專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：張耀洲;陳克溫20020101r e c o m b i n a n tV i l l a s w a se x p e c t e dt o i n f e c ts i l k w o r mb yo r a l l y t a k i n

2、gw a ya n di m p r o v et h ee x p r e s s i n ga m o u n t o f r h G M - C S F ．C h a r p t e r I I IS t u d i e s o n t h es t r u e t u r e sa n d f u n c t i o n so f B a c u l o v i r u s g e n e sA b s t r a c t S

3、e q u e n c ea n a l y s i so f C h i Ag e n eo f H e N P V a n dB m N P V s u i n d i c a t e st h a tt h eO R F o f H c N P VC h i A g e n ei s 1 6 6 2n u c l e o t i d e ( n t le n c o d i n g5 5 3a m i n o a c i da n

4、 d t h eo R F o f B m N P V s u C h i A g e n ei s 1 6 5 6n te n c o d i n g5 5 1 a a ．P h y l o g e n e t i ca n a l y s i ss h o w st h a tb a c u l o v i r u sC h i Ag e n ei s r e l a t i v e l yc o n s e r v e d i n

5、D N A a n da m i n oa c i ds e q u e n c el e v e l ，t h ea m i n oa c i ds e q u e n c ei d e n t i t yw i t hS ．m a r c e S C e mC h i Ai s u Dt o4 7 ．8 - 5 8 ．5 ％i m p l y i n g b a c u l o v i r u s C h i A g e n e i

6、 s p o s s i b l e l a t e r a l t r a n s f e r r e d f r o m b a c t e r i a ．O n t h ep h y l o g e n e t i ct r e eo f b a c u l o v i r u sC h i Ag e n e ，L d N P V j s as e p a r a t eb r a n c hi nr o o to f t h e

7、t r e e ，w h i l et h er e s tc a nb ed i v i d e di n t ot w og r o u p sw i t hH a N P V a n dH z N P V c l a s s i f i e d i n t o g r o u po n ea n dt h eo t h e r si n t og r o u pt w o ．H c N P V p 3 5 g e n es e q

8、 u e n c e a n a l y s i si n d i c a t e st h a tH c N P V p 3 5 g e n ei s9 0 0 n te n c o d i n g2 9 9 a aa n dt h a tt h en ti d e n t i t yt oB m N P V T 3 ，A c N P V ' S l N P V ，L s N P V ' H a N P V i s9

9、9 ．9 ％，9 5 ．7 ％，9 3 ．6 ％，8 0 ．2 ％，8 7 ．2 ％r e s p e c t i v e l ya n da ai d e n t i t yi s 9 9 ．7 ％，9 0 3 ％，7 7 ％，6 4 ．9 ％，7 3 ．2 ％r e s p e c t i v e l y , s h o w i n ge v o l u t i o nc o n s e r v a t i o nf o rb a

10、c u l o v i r u sp 3 5 g e n e H ¨‘o fB m N P V T 3 i s s u b s t i t u t e db yR i nH c N P V ．H c N P VP 3 5p r o t e i ni ss u r p o s e dt oh a v ea n t i —a p o p t o s i sf u n c t i o ns i m i l a rw i t hB m

11、 N P V T 3 P 3 5p r o t e i n B m N P V s u p 3 5g e n es e q u e n c e a n a l y s i si n d i c a t e si t i s8 9 7 n te n c o d i n g2 9 8a a ．S e q u e n c eh o m o l o g y b e t w e e nB m N P V s u p 3 5a n dB m N P

12、 V T 3 ，A c N P v ' S l N P Vi s 9 9 ．5 ％，9 5 ．1 ％，8 9 ．3 ％r e s p e c t i v e l y ，a n d 9 8 ．7 ％、8 94 ％、7 6 ．4 ％r e s p e c t i v e l y i n a m i n o a c i d s e q u e n c e ，p 3 5 i s i n f e r r e d h i g h l y c

13、 o n s e r v e d i n b a c u l o v i r u s d u r i n ge v o l u t i o n ．N 1 4 6 ，S 2 0 2 ，E 2 0 4 ，K 2 4 4i nB m N P V T 3 P 3 5 i sr e p l a c e db yG ，N ，Q ，Nr e s p e c t i v e l yi nB m N P V s ua n dc o r r e s p o

14、 n d i n g a m i n oa c i do f S 2 2 2i nB m N P V T 3 i sd e l e t e di nB I T l N P V s u ．T h e r e f o r et h ef u n c t i o na n da b i l i t yt or e p r e s sc e l la p o p o t o s i so f B m N P V s u P 3 5m a yb

15、es i m i l a rw i t ht h o s eo f B m N P V T 3 P 3 5 ．s o d i nH c N P V i st h es a m es e q u e n c e i nB m N P v ．a(chǎn) n dd i f f e r sf r o mA c N P V s o d o n l yi nt h r e ea m i n o a c i d s ．A m i n ea c i d se

16、s s e n t i a lf o rt h es t r u c t u r ea n da c t i v i t yo f H e N P V S O D a r eh i g h l yc o n s e r v e di nH c N P V s o 正w h i l eS O Da c t i v i t y i s 1 4 7 ．0 9 U ，m L c u l t u r e ．A n a l y s i s o fC

17、 y s t e i n e p r o t e i n a s e ( c P ) s e q u e n c e i n B m N P V s ud e t e c t e d a9 7 2n u c l e o t i d e sa c i d sO R b ' , c o d i n ga 3 2 3 a m i n oa c i d ss e q u e n c e ．H o m o l o g yi nC Pb e

18、 t w e e nB Ⅱ心口V s u a n dA c N P 、‘H c N P V ，C f N P 、‘O p N P V ，L d N P Vi s 9 6 ．5 ％，7 6 ．2 ％，7 4 ．9 ％，7 2 ．7 ％，6 2 ．9 ％，r e s p e c t i v e l ya n d9 6 ．9 ％，7 7 ．1 ％，7 9 ．3 ％，7 7 ．1 ％，6 5 ．6 ％r e s p e c t i v e l

19、yi np r o t e i ns e q u e n c e ．B m N P V C P a l s os h a r eh i g hs e q u e n c eh o m o l o g yw i t ho t h e rp a p a i ns u p e r f a m i l ym e m b e r sf r o md i f f e r e n ts o u r c e s ，h i g ha s3 2 ％w i

20、t hT r p a n o s o m ab r u c e iC R 3 1 o f 3 6c o n s e r v e da m i n oa c i d si nh i s t o n ep r o t e i n a s eB ，H ，L ，Sa n dp a p a i na r ef o u n di nB m N P V s u C P p r o t e i n ．B m N P V s uC P m a yb ec