多聚泛素及類泛素蛋白的化學(xué)合成研究.pdf

1、蛋白質(zhì)的泛素化及類泛素化修飾在真核生物細(xì)胞內(nèi)廣泛存在并參與了大部分重要的細(xì)胞生命過程，包括信號傳導(dǎo)、DNA損傷修復(fù)、蛋白降解等。不同底物的泛素及類泛素化修飾類型多種多樣且具有不同的功能，保證了修飾功能的多樣性和特異性。目前有相當(dāng)一部分具有重要功能的泛素及類泛素蛋白由于缺乏特異性的酶促合成系統(tǒng)而不易獲取。同時(shí)，獲取純凈均一的泛素探針用于研究去泛素化酶的水解機(jī)制更為困難。蛋白質(zhì)化學(xué)合成技術(shù)憑借其能夠在原子尺度精準(zhǔn)構(gòu)筑蛋白質(zhì)的優(yōu)勢，在傳統(tǒng)生物

2、酶法獲取泛素、類泛素蛋白存在制約的情況下，提供了一種行之有效的策略。本文研究工作以蛋白質(zhì)化學(xué)合成技術(shù)為工具，圍繞泛素及類泛素蛋白的化學(xué)合成開展研究。首先通過使用本課題組發(fā)展的一鍋法兩片段連接-脫硫策略，我們高效地合成了類泛素化蛋白NEDD8以及泛素探針Ub-AMC，與前人方法相比合成步驟更少，效率更高。此后，作者又運(yùn)用基于非天然氨基酸定點(diǎn)嵌入的蛋白質(zhì)半合成方法對多聚泛素鏈的合成進(jìn)行了探索。我們首先通過嵌入Alloc-Lys并使用Boc保