簡(jiǎn)介：同等學(xué)力申請(qǐng)博士學(xué)位博士學(xué)位論文學(xué)校代碼10023學(xué)號(hào)ZB2009002中國(guó)人群外周T和NK細(xì)胞淋巴瘤臨床、病理和分子生物學(xué)特點(diǎn)PERIPHERALT‘CELLANDNK。CELLLYMPHOMASINCHINESEPOPULATIONACIINICAL，PATHOLOGICALANDMOLECULARBIOLOGICALSTUDY所院姓名指導(dǎo)教師導(dǎo)師小組學(xué)科專業(yè)研究方向完成日期中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所腫瘤醫(yī)院馮曉莉口審口潘秦鏡馬潔腫瘤學(xué)淋巴瘤臨床病理特點(diǎn)2012年12月北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士研究生學(xué)位論文表索弓表索引表1免疫組化一抗來(lái)源及其識(shí)別抗原的部位16表2BIOMED2多重引物TCRG和TCRB序列及長(zhǎng)度21表3PT／NKCL各型的總例數(shù)以及所占的百分比23表4PT／NKCL的平均年齡、中位年齡及最小和最大年齡24表5各型的男女比以及各型結(jié)內(nèi)外的發(fā)病率25表6血清132微球蛋白在各型的升高百分比率25表7血清LDH在各型的升高百分比26表8CD2在PT／NKCL各型中的表達(dá)率28表9CD3在PT／NKCL各型中的表達(dá)率29表10CD4在PT／NKCL各型中的表達(dá)率30表11CD5在PT／NKCL各型中的表達(dá)率31表12CD7在PT／NKCL各型中的表達(dá)率一32表L3CD8在PT／NKCL各型中的表達(dá)率33表14CD10在PT／NKCL各型中的表達(dá)率34表15CD56在PT／NKCL各型中的表達(dá)率35表16TIA在PT／NKCL各型中的表達(dá)率36表17GB在PT／NKCL各型中的表達(dá)率37表L8PERFORIN在PT／NKCL各型中的表達(dá)率38表19CD30在PT／NKCL各型中的表達(dá)率39表20ALK在PT／NKCL各型中的表達(dá)率40表21RLM23在PT／NKCL各型中的表達(dá)率413

簡(jiǎn)介：不同于單細(xì)胞生物，多細(xì)胞生物的生長(zhǎng)和生存依賴于環(huán)境中均衡的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)，這些營(yíng)養(yǎng)包括了葡萄糖、氨基酸和生長(zhǎng)因子等。ULK1蛋白是細(xì)胞自噬過(guò)程中的關(guān)鍵蛋白，它介導(dǎo)了細(xì)胞對(duì)于胞外營(yíng)養(yǎng)狀況的感知與應(yīng)激。然而，ULK1是如何在不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏時(shí)候被激活，以及激活的ULK1是否參與了自噬過(guò)程之外的其他代謝通路的調(diào)控還沒(méi)有被研究得很透徹。在本論文中，將展示兩部分的內(nèi)容，第一部分是介紹ULK1蛋白在生長(zhǎng)因子缺乏情況下的激活機(jī)制第二部分則是闡述ULK1在葡萄糖分解代謝上的重要功能。在第一部分，我們發(fā)現(xiàn)，在生長(zhǎng)因子缺乏的條件下，細(xì)胞中的GSK3蛋白激酶會(huì)由于被去抑制化而得到激活，其激活之后會(huì)直接地磷酸化乙酰基轉(zhuǎn)移酶TIP60的絲氨酸86位點(diǎn)，從而使TIP60的乙?；D(zhuǎn)移酶活性獲得提升，而活化的TIP60又可以進(jìn)一步地乙?；⒓せ钭允蓡?dòng)蛋白ULK1，最終引起此時(shí)自噬的發(fā)生。在第二部分，我們的研究顯示，在血清與氨基酸共同饑餓的情況下，激活的ULK1會(huì)直接地磷酸化多個(gè)糖代謝相關(guān)的酶，包括屬于糖酵解途徑的酶HK、PFK1和ENO1，以及屬于糖異生途徑的酶FBP1。ULK1對(duì)這幾個(gè)酶的磷酸化不僅可以防止此時(shí)糖酵解速率的大幅降低，也可以使更高比例的糖代謝中間物流向磷酸戊糖途徑PPP，從而維持細(xì)胞內(nèi)的能量與氧化還原穩(wěn)態(tài)。這些發(fā)現(xiàn)直接地將生長(zhǎng)因子饑餓信號(hào)與自噬的發(fā)生過(guò)程通過(guò)乙?；c磷酸化聯(lián)系在了一起同時(shí)，也闡述了在營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí)，細(xì)胞通過(guò)激活ULK1來(lái)介導(dǎo)葡萄糖分解代謝重編程的詳細(xì)機(jī)理。我們相信，對(duì)這些調(diào)控過(guò)程的了解將很可能為我們預(yù)防和治療人類的代謝疾病提供新的的思路。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)學(xué)號(hào)學(xué)號(hào)M20107M201075632632學(xué)校代碼學(xué)校代碼1048710487密級(jí)密級(jí)碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文慢性慢性髓細(xì)胞白血病患者細(xì)胞白血病患者的細(xì)胞遺傳學(xué)與分子的細(xì)胞遺傳學(xué)與分子生物學(xué)生物學(xué)檢測(cè)檢測(cè)學(xué)位申請(qǐng)人學(xué)位申請(qǐng)人何麗學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)血液內(nèi)科血液內(nèi)科指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師孟力教授教授答辯日期答辯日期2013年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果。對(duì)本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本人將承擔(dān)本聲明引起的一切法律后果。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權(quán)書(shū)。本論文屬于不保密□。（請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日

簡(jiǎn)介：旋唇類纖毛蟲(chóng)是一大類高度進(jìn)化的單細(xì)胞原生動(dòng)物因其獨(dú)具的兩種功能的細(xì)胞核高度復(fù)雜而特化的表膜下纖維系統(tǒng)及高度多樣化的生物學(xué)特征被廣泛用作細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞衰老與分化、信息傳遞、遺傳學(xué)、核質(zhì)關(guān)系探討等研究的實(shí)驗(yàn)材料由于該類群細(xì)胞結(jié)構(gòu)復(fù)雜生物多樣性高基于傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)特征的分類和系統(tǒng)學(xué)至今存在大量混亂而分子標(biāo)記從基因水平反應(yīng)物種的遺傳變異、生物多樣性及其進(jìn)化時(shí)序從而可有效解決纖毛蟲(chóng)傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)上的若干存疑基于此我們的工作就旋唇類纖毛蟲(chóng)若干種屬在分類和系統(tǒng)歸屬上的混亂和疑點(diǎn)利用多種分子生物學(xué)技術(shù)RAPDARDRA和SSRRNA基因序列比較對(duì)其進(jìn)行了分類學(xué)和系統(tǒng)學(xué)兩個(gè)層次上的探討

簡(jiǎn)介：細(xì)菌耐藥性目前己成為全球性關(guān)注的問(wèn)題耐藥細(xì)菌所致感染已構(gòu)成新世紀(jì)抗感染治療的新挑戰(zhàn)是當(dāng)前人類健康和生命面臨的主要威脅。腸桿菌科細(xì)菌分布廣與人類關(guān)系密切。在醫(yī)院感染中腸桿菌科細(xì)菌包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等是引起醫(yī)院感染最常見(jiàn)的病原菌并以多重耐藥菌株引起的感染為顯著特點(diǎn)。碳青霉烯類抗生素是目前臨床治療產(chǎn)超廣譜Β內(nèi)酰胺酶EXTENDEDSPECTRUMΒLACTAMASESESBLS及AMPC酶等多重耐藥菌株所引起感染的最有效的抗菌藥。但隨著該類抗生素在臨床上的廣泛應(yīng)用及不合理使用臨床上已出現(xiàn)對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥的菌株。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥機(jī)制報(bào)道主要集中在四個(gè)方面①產(chǎn)生碳青霉烯酶如IMP型和VIM型金屬酶以及KPCKLEBSIELLAPNEUMONIAECARBAPENEMASEKPC型碳青霉烯酶等②ESBL和或AMPC酶過(guò)度表達(dá)同時(shí)合并外膜孔蛋白的丟失③外排泵高表達(dá)的膜屏障機(jī)制④藥物靶位改變。在上述幾種耐藥機(jī)制中產(chǎn)碳青霉烯酶是腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類耐藥最主要的機(jī)制。駱俊等人對(duì)2003年6月到2004年5月華山醫(yī)院臨床分離的耐亞胺培南的革蘭陰性桿菌中的碳青霉烯酶進(jìn)行了篩查發(fā)現(xiàn)細(xì)菌產(chǎn)碳青霉烯酶是不動(dòng)桿菌和弗勞地檸檬酸桿菌對(duì)亞胺培南和美羅培南等碳青霉烯類抗生素耐藥的主要原因之一。沈繼錄等人采用瓊脂稀釋法測(cè)定亞胺培南和美羅培南對(duì)199株革蘭陰性桿菌的最低抑菌濃度MIC結(jié)果顯示耐碳青霉烯類革蘭陰性桿菌對(duì)12種抗生素的耐藥率均高于碳青霉烯類敏感革蘭陰性桿菌的耐藥率而且產(chǎn)生多種碳青霉烯酶如KPC、IMP、VIM和OXA型碳青霉烯酶等并在弗勞地檸檬酸桿菌、鮑曼不動(dòng)桿菌和肺炎克雷伯菌中有產(chǎn)酶克隆株的流行。在巴西腸桿菌科細(xì)菌中對(duì)碳青霉烯耐藥已成為主要問(wèn)題特別是產(chǎn)KPC酶的耐藥株己在多個(gè)地區(qū)報(bào)道。柳葉刀報(bào)道的產(chǎn)NDM1酶的超級(jí)細(xì)菌在大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中最多見(jiàn)并且已傳播到印度以外的國(guó)家。雖然腸桿菌科細(xì)菌可通過(guò)產(chǎn)生金屬酶而對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥但此類菌株的檢出率極少。自2001年報(bào)道第一株產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌以來(lái)有關(guān)碳青霉烯酶尤其是KPC酶的研究目前己成為國(guó)際關(guān)注焦點(diǎn)世界各地不斷出現(xiàn)此類菌株引起的醫(yī)院感染的報(bào)告其檢出率亦呈快速上升的趨勢(shì)。2005年2008年華山醫(yī)院臨床分離的肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南、美羅培南和厄他培南等抗菌藥的耐藥率均在2％以下但2009年快速上升至13％左右2010年更是上升為263％。弗勞地檸檬酸桿菌2005年對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥率在1O％2006年快速上升至45％左右2007年2009年維持在35％左右。進(jìn)一步的資料分析結(jié)果顯示華山醫(yī)院臨床分離的對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥的腸桿菌科細(xì)菌中大部分菌株集中于神經(jīng)外科病房和重癥ICU病房。由于KPC酶基因往往位于質(zhì)粒上該質(zhì)粒同時(shí)亦可攜帶多種對(duì)其他抗菌藥耐藥的基因因此產(chǎn)KPC酶的菌株往往具有高度的耐藥性和廣泛的播散性臨床上對(duì)該類菌株引起的感染治療是一個(gè)棘手的問(wèn)題?；诖吮菊n題對(duì)2009年4月到2010年2月期間華山醫(yī)院臨床分離的82株對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥的腸桿菌科細(xì)菌CARBAPENEMRESISLANTENTEROBACTERIACEAECRE進(jìn)行了分子生物學(xué)及其臨床感染特征的研究以明確本院CRE菌株的耐藥現(xiàn)狀、耐藥機(jī)制、傳播機(jī)制及其感染的危險(xiǎn)因素。為針對(duì)CRE感染的抗生素合理選用提供依據(jù)這對(duì)及時(shí)遏制CRE菌株引起的持續(xù)感染和暴發(fā)流行降低醫(yī)院感染的發(fā)生率和病死率有重要意義。本研究?jī)?nèi)容共包括以下四部分。第一部分碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)及其同源性分析為了解華山醫(yī)院腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥性我們收集了2009年4月到2010年2月的1561株腸桿菌科細(xì)菌采用紙片擴(kuò)散法對(duì)收集的菌株進(jìn)行耐藥譜的初步分析并根據(jù)2010年更新版的CLSICLINICALLABATYSTSRDINSTITUTE文件中各類抗生素對(duì)腸桿菌科細(xì)菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)顯示1561株腸桿菌科細(xì)菌中肺炎克雷伯菌最常見(jiàn)共檢出604株387％其中有113株CRE菌株其次是大腸埃希菌共檢出581株其中有12株CRE菌株。在1561株腸桿菌科細(xì)菌中奇異變形桿菌和陰溝腸桿菌各占5％左右且181％的陰溝腸桿菌為CRE菌株粘質(zhì)沙雷菌、斯氏普羅威登菌、摩根摩根菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、普通變形桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌和雷氏普羅威登菌的菌株比例在14％之間其余的菌株比例都在1％以下。細(xì)菌檢出以呼吸道和尿路為主要來(lái)源各占464％7251561和346％5401561。男性患者有862位女性患者有673位另有26位信息缺失?；颊咧饕獮?080歲的中老年人占594％9271561。按照2009年版CLSI文件標(biāo)準(zhǔn)除個(gè)別菌株保存不佳外細(xì)菌經(jīng)分離純化培養(yǎng)最后共收集有82株CRE菌株作為本組受試菌株包括68株肺炎克雷伯菌KLEBSIELLAPNEUMONIAE、KPN、3株大腸埃希菌ESCHERICHIACOLI、ECO、3株陰溝腸桿菌ENTEROBACTERCLOACAE、ECL、4株弗勞地檸檬酸桿菌CITROBACTERFREUNDII、CFR、1株產(chǎn)氣腸桿菌ENTEROBACTERAEROGENES、EAE、1株斯氏普羅威登菌PROVIDENCIASTUARTII、PST、1株丙二酸鹽檸檬酸桿菌CITROBACTERMALONATE、CML和1株產(chǎn)酸克雷伯菌KLEBSIELLAOXYTOCA、KOX。采用瓊脂對(duì)倍稀釋法測(cè)定包括厄他培南、美羅培南和亞胺培南3種碳青霉烯類、頭孢菌素類、氟喹諾酮類和氨基糖苷類等16種抗生素對(duì)82株CRE菌株的MIC除了黏菌素和替加環(huán)素判斷標(biāo)準(zhǔn)按BSACBRIFISHSOCIETYFANTIMICROBIALCHEMOTHERAPYCRITERIAVERSION91MARCH2010外其余MIC結(jié)果按2010年更新版CLSI文件標(biāo)準(zhǔn)。以下研究的受試菌株均為82株CRE菌株。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示82株CRE菌株中68株耐碳青霉烯類抗生素的肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢他啶頭孢噻肟頭孢吡肟氨曲南以及厄他培南的耐藥率為100％對(duì)兩種酶抑制劑復(fù)方制劑頭孢哌酮舒巴坦和哌拉西林他巴唑坦的耐藥率均為95％左右對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率為90％左右對(duì)阿米卡星和環(huán)丙沙星的耐藥率分別為853％和971％。68株耐碳青霉烯類抗生素的肺炎克雷伯菌中有70％的菌株對(duì)磷霉素和多西環(huán)素敏感對(duì)黏菌素、米諾環(huán)素和替加環(huán)素的耐藥率相對(duì)較低分別為29％74％和132％。14株其他CRE菌株對(duì)環(huán)丙沙星和厄他培南全耐藥對(duì)兩種酶抑制劑復(fù)方制劑以及頭孢他啶、頭孢噻肟、氨曲南的耐藥率均為923％846％的菌株對(duì)頭孢吡肟和阿米卡星耐藥對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為769％和615％近70％的菌株對(duì)磷霉素耐藥近60％的菌株對(duì)多西環(huán)素耐藥對(duì)黏菌素、米諾環(huán)素和替加環(huán)素耐藥率分別為154％385％和231％。16種抗生素中黏菌素和替加環(huán)素對(duì)82株CRE菌株的抗菌活性比較高以2ΜGML和4ΜGML的濃度可以抑制90％的細(xì)菌。82株CRE菌株對(duì)碳青霉烯類和頭孢菌素類抗生素表現(xiàn)出高度耐藥水平如亞胺培南、美羅培南、厄他培南對(duì)82株CRE菌株的MIC50MIC90的值分別是3264ΜGML64128ΜGML和128256ΜGML。對(duì)碳青霉烯類抗生素全耐藥的細(xì)菌有68株其中60株為肺炎克雷伯菌。頭孢菌素類抗生素對(duì)82株CRE菌株的MIC90值均≧256ΜGML。本組受試的82株CRE均為多重耐藥株其中泛耐藥菌株有54株659％5482。此外對(duì)68株碳青霉烯類耐藥的肺炎克雷伯菌株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示碳青霉烯類抗生素聯(lián)合酶抑制劑克拉維酸或EDTA后碳青霉烯類抗生素的抗菌活性幾乎沒(méi)有改變但碳青霉烯類抗生素聯(lián)合3氨基苯硼酸的抗菌活性有所提高聯(lián)合3氨基苯硼酸后的亞胺培南、美羅培南、厄他培南對(duì)68株CRE肺炎克雷伯菌的MIC50MIC90分別為11ΜGML44ΜGML和88ΜGML與單藥相比分別下降為單藥的132到164特別是亞胺培南聯(lián)合3氨基苯硼酸對(duì)細(xì)菌的作用特別強(qiáng)。碳青霉烯類抗生素聯(lián)合3氨基苯硼酸后對(duì)14株其他CRE菌株的抑菌作用也很明顯。碳青霉烯類抗生素聯(lián)合外排泵抑制劑MC207110對(duì)68株CRE肺炎克雷伯菌的體外抗菌活性無(wú)影響而對(duì)14株其他CRE菌株的MIC50值顯示有升高。對(duì)68株碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌的PFGE分型采用QUANTITYONE圖像分析軟件可分為18個(gè)型別。3個(gè)主要型別分別是J型14株206％、N型12株176％和R型12株176％。其余如Q型6株I型5株D型4株G、H和P型各有2株A、B、C、E、F、K、L、M和O型各一株。MLST分型顯示優(yōu)勢(shì)的克隆株為ST11型有57株838％其他的有ST350型2株ST16ST22ST23ST27ST107ST148ST477ST494和ST544型別各一株。PFGE的3種主要型別均屬于ST11型。本組資料提示①碳青霉烯類耐藥株大多為泛耐藥株659％5482。②黏菌素和替加環(huán)素具有體外抗CRE菌株的活性。③碳青霉烯類聯(lián)合3氨基苯硼酸對(duì)CRE菌株具有良好的抗菌活性碳青霉烯類抗生素和外排泵抑制劑MC207110的聯(lián)合未見(jiàn)碳青霉烯類抗生素對(duì)碳青霉烯類耐藥株的MICS降低。④本組受試細(xì)菌存在3個(gè)主要克隆流行株即J型14株206％、N型12株176％和R型12株176％。ST11為主要優(yōu)勢(shì)型別占838％5768。PFGE分型中的主要型別J、N和R型都屬于ST11。第二部分CRE菌株中碳青霉烯酶及Β內(nèi)酰胺酶基因型的分析本研究采用改良HODGE試驗(yàn)MHT和3氨基苯硼酸檢測(cè)法進(jìn)行碳青霉烯酶表型的檢測(cè)。MHT對(duì)82株CRE的碳青霉烯酶的檢出菌株數(shù)為67株。以PCR方法為金標(biāo)準(zhǔn)改良HODGE試驗(yàn)對(duì)82株CRE的碳青霉烯酶的檢出敏感性和特異性分別是899％6269和615％813。假陽(yáng)性率和假陰性率分別為72％569和538％713。3氨基苯硼酸抑制實(shí)驗(yàn)檢測(cè)82株CRE中產(chǎn)碳青霉烯酶的菌株有70株與PCR方法相比較其靈敏度和特異性分別為927％6469和538％713假陽(yáng)性率和假陰性率分別為88％669和385％513。改良HODGE試驗(yàn)以及3氨基苯硼酸2種方法對(duì)CRE腸桿菌科細(xì)菌中產(chǎn)碳青霉烯酶的檢出率分別與PCR方法相比較并作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理顯示差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。EDTA協(xié)同碳青霉烯類抗生素檢測(cè)金屬酶結(jié)果顯示82株CRE菌株中未檢測(cè)到細(xì)菌產(chǎn)金屬酶。目前檢測(cè)KPC型碳青霉烯酶等耐藥基因的金標(biāo)準(zhǔn)仍是通過(guò)PCR擴(kuò)增編碼KPC酶的耐藥基因并配合DNA測(cè)序分析以明確KPC酶的型別。我們采用PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)82株CRE菌株中的碳青霉烯酶基因進(jìn)行擴(kuò)增并作DNA測(cè)序結(jié)果顯示在肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、弗勞地檸檬酸桿菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌菌種中都檢出到產(chǎn)KPC酶的菌株。841％6982的CRE菌株產(chǎn)生KPC型碳青霉烯酶酶2株同時(shí)產(chǎn)OXA69LIKE型碳青霉烯酶。未檢測(cè)到產(chǎn)金屬Β內(nèi)酰胺酶的菌株。此外采用PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)82株CRE菌中包括ESBLS和質(zhì)粒AMPC酶基因在內(nèi)的Β內(nèi)酰胺酶基因進(jìn)行擴(kuò)增和作DNA測(cè)序分析結(jié)果顯示編碼ESBLS酶的基因在CRE細(xì)菌中普遍存在。其中產(chǎn)CTXM型ESBLS酶的菌株有74株902％SHV12型ESBLS酶有33株402％1株產(chǎn)SHV31型ESBL。6株CRE細(xì)菌產(chǎn)質(zhì)粒介導(dǎo)的AMPC酶占73％682均為DHA1型酶基因。產(chǎn)OXA1、OXA2和OXA10等超廣譜酶的細(xì)菌各檢出1株產(chǎn)TEM1廣譜酶的細(xì)菌占354％2982。上述69株產(chǎn)KPC酶的CRE菌株中僅1株細(xì)菌為單產(chǎn)KPC酶其余67株合并產(chǎn)。ESBL酶另有1株合并產(chǎn)AMPC型酶。為了解臨床分離的CRE細(xì)菌中編碼的KPC酶基因是否可在不同種屬的細(xì)菌間進(jìn)行傳播我們對(duì)4株同時(shí)產(chǎn)KPC2酶和CTXM型ESBL或DHA1酶的CRE菌株弗勞地檸檬酸桿菌和肺炎克雷伯菌各2株進(jìn)行了接合轉(zhuǎn)移試驗(yàn)。受體菌為大腸埃希菌J53對(duì)疊氮鈉耐藥和EC600對(duì)利福平耐藥。結(jié)果顯示2株弗勞地檸檬酸桿菌分別將耐藥質(zhì)粒轉(zhuǎn)移接合到了受體菌大腸埃希菌J53和EC600。KPC酶基因的PCR擴(kuò)增和耐藥表型測(cè)定轉(zhuǎn)移接合子均和供體細(xì)菌一致。抽提供體菌CRE3180和相應(yīng)的大腸埃希菌J53的接合子中的質(zhì)粒對(duì)其進(jìn)行了地高辛標(biāo)記的檢測(cè)KPC基因的SOUTHERN雜交試驗(yàn)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)移到接合子中的質(zhì)粒攜帶KPC基因質(zhì)粒大小為23KB左右。而以EC600為受體菌的3株接合子中均檢測(cè)到3條質(zhì)粒經(jīng)過(guò)SOUTHERN雜交試驗(yàn)證實(shí)3條質(zhì)粒均帶有KPC基因。質(zhì)粒大小不等除一條為23KB左右外其余兩條在23KB以上。本研究采用PCR方法對(duì)I、II、Ⅲ類整合子在CRE菌中的分布及其攜帶的耐藥基因盒進(jìn)行了分析結(jié)果顯示68株CRE肺炎克雷伯菌株中I類整合子和Ⅱ類整合子的檢出率分別為559％3868和44％368。其余14株CRE菌株的I類整合子和Ⅱ類整合子的檢出率分別為785％1114和71％114。未見(jiàn)Ⅲ類整合子檢出。I類整合子陽(yáng)性的細(xì)菌中有918％4549的菌株為產(chǎn)KPC酶株且同時(shí)合并產(chǎn)ESBL內(nèi)酰胺酶其中肺炎克雷伯菌占了734％3649。Ⅱ類整合子陽(yáng)性的細(xì)菌中產(chǎn)KPC酶的菌株有3株且均為肺炎克雷伯菌。同時(shí)兼有兩類整合子檢出的細(xì)菌有2株均為產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌。PCR擴(kuò)增整合子可變區(qū)的序列可以得到3種大小不同的片段分別約為250BP750BP和1000BP?？勺儏^(qū)序列用HINFⅠ酶切后得到3組不同的片段。對(duì)PCR陽(yáng)性結(jié)果的可變區(qū)序列進(jìn)行測(cè)序除了編碼氨基糖苷類鈍化酶基因AAC3I外未發(fā)現(xiàn)其他耐藥基因盒。本組資料結(jié)果提示①KPC2型碳青霉烯酶是腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類耐藥的主要機(jī)制之一。②KPC2基因可由質(zhì)粒攜帶并可在不同的細(xì)菌種屬間進(jìn)行轉(zhuǎn)移播散。③I類整合子在本試驗(yàn)菌株中檢出率高597％4982。④改良HODGE試驗(yàn)和3氨基苯硼酸抑制試驗(yàn)檢測(cè)腸桿菌科細(xì)菌中碳青霉烯酶的靈敏度高與PCR方法比較上述兩種方法對(duì)CRE腸桿菌科細(xì)菌中碳青霉烯酶的檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第三部分碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌的外膜孔蛋白分析采用外膜孔蛋白SDSPAGE電泳對(duì)82株CRE菌株的外膜孔蛋白進(jìn)行分析結(jié)果顯示22株CRE菌株存在OMPK35或其同源膜孔蛋白如OMPC的下調(diào)其中17株為肺炎克雷伯菌有22株存在OMPK35或其同源膜孔蛋白的缺失其中15株為肺炎克雷伯菌OMPK35或其同源膜孔蛋白正常的為38株CRE其中36株為肺炎克雷伯菌。10株CRE菌株存在OMPK36或其同源膜孔蛋白如OMPF的下調(diào)其中5株為肺炎克雷伯菌有57株存在OMPK36或其同源膜孔蛋白的缺失其中48株為肺炎克雷伯菌OMPK36或其同源膜孔蛋白正常的為15株CRE全部為肺炎克雷伯菌。同時(shí)有OMPK35和OMPK36或其同源膜孔蛋白缺失的有12株其中9株為肺炎克雷伯菌。658％5482的肺炎克雷伯菌株缺失OMPK35和OMPK36中的1條或者兩條都缺失兩種膜孔蛋白表達(dá)都正常的有12株全部為肺炎克雷伯菌。從膜孔蛋白角度看OMPK36蛋白缺失的菌株占多數(shù)肺炎克雷伯菌中有48株14株其他CRE菌株中有9株。本組試驗(yàn)顯示細(xì)菌膜孔蛋白的缺失或下調(diào)表達(dá)也是腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類產(chǎn)生耐藥的機(jī)制之一。第四部分產(chǎn)KPC酶的CRE菌株感染患者的臨床感染特征及危險(xiǎn)因素為了解CRE菌株感染或定植患者的臨床感染特征及感染的危險(xiǎn)因素我們對(duì)本研究中68份保存完整的病史資料進(jìn)行了回顧性的調(diào)查分析同時(shí)以同期85份臨床分離的對(duì)碳青霉烯類抗生素敏感的菌株CSE檢出患者的病史資料作為對(duì)照剔除或者不剔除定植菌株的患者資料分析CRE和CSE菌株感染患者的臨床特征然后剔除其他菌株分析產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌感染患者非產(chǎn)KPC酶組分為兩種情況CRE組非產(chǎn)KPC酶CSE非產(chǎn)KPC酶株感染的患者、CSE非產(chǎn)KPC酶株感染的患者的潛在危險(xiǎn)因素。結(jié)果顯示CRE菌株感染患者的總住院天數(shù)平均值為4955±3691天有56966％位患者為院內(nèi)感染234％位患者為院外感染。住院期間有一次或以上手術(shù)者占379％2258。有638％3758的患者住院期間更換床位一次或以上155％958的患者住院期間更換床位三次及以上。除2位患者沒(méi)有創(chuàng)傷性操作外其余都有過(guò)創(chuàng)傷性的操作如氣管切開(kāi)、深淺靜脈穿刺、腰穿和或引流等。分別有948％5558、534％3158的患者使用過(guò)導(dǎo)尿管和接受機(jī)械通氣住院期間抗菌藥物的使用情況如下使用碳青霉烯類、喹諾酮類、氨基糖苷類、頭孢菌素類和其他類別抗生素如四環(huán)素類、抗結(jié)核藥物、惡唑烷酮類、磷霉素類、抗真菌類和萬(wàn)古霉素類等的患者數(shù)分別占707％4158、353％2458、397％2358、431％2558和759％4458。58位患者用于治療疾病的總費(fèi)用平均值為408X106±174105元。除6位患者死亡4位患者未愈之外其余都有好轉(zhuǎn)或治愈。單因素分析CRE菌株感染患者的臨床特征提示醫(yī)院感染、碳青霉烯類應(yīng)用、侵襲性操作、手術(shù)、床位更換、氨基糖苷類應(yīng)用、基礎(chǔ)疾病、神經(jīng)外科和ICU病房的差異是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的。多因素分析醫(yī)院感染是CRE菌株感染患者的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。單因素分析產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌感染的危險(xiǎn)因素包括醫(yī)院感染、碳青霉烯類應(yīng)用、侵襲性操作、神經(jīng)外科和ICU病房。多因素分析顯示其中醫(yī)院感染、神經(jīng)外科和ICU病房是產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本組資料提示①碳青霉烯類和頭孢菌素類抗生素在臨床感染治療中使用頻繁②醫(yī)院感染是ERE菌株感染患者的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。醫(yī)院感染、神經(jīng)外科和ICU病房是產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素③臨床應(yīng)加強(qiáng)CRE菌株的監(jiān)測(cè)并采取行之有效的醫(yī)院感染控制措施限制CRE菌株的進(jìn)一步播散例如對(duì)檢出CRE菌株感染或定植患者的床旁隔離醫(yī)護(hù)人員良好的手衛(wèi)生習(xí)慣限制頻繁的病床更換合理應(yīng)用碳青霉烯類抗生素等。

簡(jiǎn)介：研究背景和目的機(jī)體膽固醇代謝異常被認(rèn)為是導(dǎo)致膽汁膽固醇過(guò)飽和及膽石形成的主要原因。肝臟與小腸是參與膽固醇代謝的主要臟器。我們課題組曾對(duì)膽石患者肝臟膽固醇代謝相關(guān)基因的表達(dá)差異進(jìn)行分析。在此基礎(chǔ)上，本研究分析了膽石患者近段空腸粘膜膽固醇吸收相關(guān)基因的表達(dá)。鑒于多數(shù)膽固醇代謝相關(guān)基因受核受體LXRS調(diào)節(jié)，本研究以動(dòng)物模型和LXRS激動(dòng)劑為基礎(chǔ)，進(jìn)一步研究基礎(chǔ)狀態(tài)下和LXRS作用下不同成石易感性小鼠的肝臟、小腸以及巨噬細(xì)胞膽固醇代謝相關(guān)基因表達(dá)的差異，探討膽固醇代謝異常在膽石病發(fā)生中的分子生物學(xué)機(jī)制。材料與方法第一部分，臨床研究收集19例膽囊結(jié)石患者年齡531±37；男女136與22例無(wú)結(jié)石對(duì)照年齡558±34；男女1111的近段空腸粘膜、膽汁與靜脈血。REALTIMEPCR方法檢測(cè)近段空腸粘膜ABCG5、ABCG8、NPCIL1、SRB1、MTTP、ACAT2、HMGCR、ABCA1以及LXRΑ基因MRNA表達(dá)。分析血清與膽汁的脂質(zhì)成分。第二部分，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究以LXRS激動(dòng)劑T0901317分別喂養(yǎng)雄性C57BL6小鼠實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組99與雄性AKR小鼠實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組76，采集肝臟、小腸、腹腔巨噬細(xì)胞、膽汁以及血清。REALTIMEPCR方法分別檢測(cè)ABCG5、ABCG8、SRB1、MTTP、HMGCR、ABCA1、ACAT2、CYP7A1、SREBP1C、SREBP2、NPCLL1以及ABCG1基因MRNA表達(dá)。分析血清與膽汁的脂質(zhì)成分。結(jié)果臨床研究的膽石組患者膽汁膽固醇飽和指數(shù)較對(duì)照組明顯升高P＜001。血清脂質(zhì)分析未發(fā)現(xiàn)兩組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。近段空腸粘膜ABCG5與ABCG8基因MRNA表達(dá)顯著正相關(guān)R079，P＜001，且分別與LXRΑ存在顯著的正相關(guān)性ABCG5，R043，P＜001；ABCG8，R044，P＜001。膽石組與對(duì)照組的近段空腸粘膜膽固醇吸收相關(guān)基因MRNA表達(dá)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。女性膽石組患者近段空腸粘膜ABCG5與ABCG8表達(dá)較女性對(duì)照分別升高114％與74％ABCG5與ABCG8，均P＜005。MTTP和SRB1表達(dá)則分別是女性對(duì)照的213倍和272倍MTTP與SRB1，均P＜001。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中，C57BL6小鼠膽汁膽固醇水平是AKR小鼠的148倍，T0901317喂養(yǎng)后分別升高39％與10％。C57BL6小鼠肝臟MTTP與小腸ABCG8表達(dá)低于AKR小鼠MTTP與ABCG8，均P＜005。T0901317喂養(yǎng)后兩種小鼠肝臟ABCG5、ABCG8、ABCA1以及SREBP1C表達(dá)顯著升高ABCG5ABCG8與SREBP1C均P＜001ABCA1，P＜005。兩種小鼠小腸ABCG5、ABCG8以及ABCA1表達(dá)也出現(xiàn)上調(diào)ABCG5ABCG8與ABCA1，均P＜001。AKR小鼠還出現(xiàn)小腸MTTP與ACAT2表達(dá)下調(diào)以及SREBP2表達(dá)升高M(jìn)TTP、ACAT2與SREBP2，均P＜005。T0901317喂養(yǎng)后，C57BL6小鼠腹腔巨噬細(xì)胞ABCA1表達(dá)上調(diào)明顯P＜005。結(jié)論1膽石病患者近段空腸粘膜膽固醇吸收相關(guān)基因的MRNA表達(dá)與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明不同人群小腸膽固醇吸收相關(guān)基因表達(dá)差異可能不是膽石病發(fā)生的主要遺傳因素。2女性膽石病患者近段空腸粘膜SRB1表達(dá)升高可能拮抗了因ABCG5與ABCG8上調(diào)導(dǎo)致的膽固醇丟失。3C57BL6小鼠肝臟MTTP與小腸ABCG8基因表達(dá)降低可能導(dǎo)致肝臟合成VLDL能力減弱以及小腸膽固醇吸收增加。這是導(dǎo)致C57BL6小鼠膽汁膽固醇水平高于AKR小鼠且易于成石的遺傳基礎(chǔ)。4LXRS激活顯著增強(qiáng)C57BL6小鼠ABCA1介導(dǎo)的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，而對(duì)小腸膽固醇吸收的抑制作用相對(duì)較弱。兩者共同作用導(dǎo)致C57BL6小鼠在LXRS激活后膽汁膽固醇水平升高較AKR小鼠更為明顯。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)VDC博士學(xué)位論文密級(jí)5AZACDR對(duì)人膀胱癌細(xì)胞株T24細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其分子生物學(xué)機(jī)制的研究STUDIESOFTHEINFLUENCEOF5AZACDRONTHEBIOLOGICALBEHAVIORSANDTHEMECHANISMOFMOLECULARBIOLOGYTOHUMANBLADDERCARCINOMACELLLINETLINE12。‘4。作者姓名胡勝學(xué)科專業(yè)泌尿臨床學(xué)院、系所湘雅二醫(yī)院指教教師楊羅艷論文答辯日期2絲叢￡答辯委員會(huì)主席磊之磁、、中南大學(xué)二。一。年十月原創(chuàng)性聲明IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIILY1918180本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明。作者簽名塵出生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國(guó)家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。作者簽名幺L睦導(dǎo)師簽名差塹童壘日期趁絲年止月蘭日作者簽名幺L睦導(dǎo)師簽名』竺L至掣日期趁絲年止月蘭日

簡(jiǎn)介：目的觀察參芪解毒湯SQJDD對(duì)治療后的慢性腎功能衰竭CRF大鼠腎組織的分子生物學(xué)影響，探討SQJDD治療慢性腎功能衰竭的機(jī)制。方法1動(dòng)物模型復(fù)制將90只健康WISTAR雄性大鼠隨機(jī)分成正常組、模型組、低劑量SQJDD組、中劑量SQJDD組和高劑量SQJDD組，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。采用25％的腺嘌呤灌胃4周來(lái)誘導(dǎo)大鼠形成慢性腎功能衰竭模型。2分子生物學(xué)檢測(cè)模型復(fù)制后，通過(guò)檢測(cè)血肌酐SCR、尿素氮BUN水平來(lái)判斷是否造模成功。經(jīng)過(guò)SQJDD干預(yù)治療8周后，檢測(cè)SCR、BUN、24小時(shí)尿蛋白定量24HRUP、三酰甘油TAG、膽固醇CHOL、血清白蛋白ALB水平；處死大鼠，采用HE染色觀察各組大鼠腎臟組織的病理改變；應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)結(jié)締組織生長(zhǎng)因子CTGF、血小板源性生長(zhǎng)因子BPDGFB的表達(dá)情況；采用蛋白印跡法WESTERNBLOTTING檢測(cè)各組大鼠腎臟組織轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子Β1TGFΒ1、SMAD2、SMAD3的表達(dá)情況。結(jié)果1模型復(fù)制結(jié)果腺嘌呤灌胃后，模型組及低、中、高劑量SQJDD組的SCR、BUN水平均較正常組明顯升高P＜001，提示慢性腎衰大鼠模型制作成功。2藥物干預(yù)結(jié)果與治療前相比，低、中、高劑量SQJDD組的SCR、BUN水平明顯降低P＜001；治療后，各治療組的SCR、BUN水平均低于模型組（P＜001），提示SQJDD可以降低SCR、BUN水平；治療后，各治療組24HRUP、CHOL水平均低于模型組P＜001，P＜005，ALB水平高于模型組P＜001，提示SQJDD可以降低24HRUP、CHOL，升高ALB病理結(jié)果顯示，各治療組大鼠的腎臟組織病理?yè)p傷明顯輕于模型組，提示SQJDD能減輕腎組織損傷。免疫組化結(jié)果顯示，各治療組CTGF、PDGFB在腎組織的表達(dá)均明顯低于模型組P＜001，提示SQJDD可以減少腎衰大鼠腎組織的CTGF、PDGFB的表達(dá)；蛋白印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示，各治療組腎組織的TGFΒ1、SMAD2、SMAD3蛋白表達(dá)均低于模型組（P＜001），提示SQJDD可減少腎衰大鼠腎組織的TGFΒ1、SMAD2、SMAD3蛋白的表達(dá)。結(jié)論SQJDD可能是通過(guò)減少CTGF、PDGFB、TGFΒ1、SMAD2、SMAD3在腎組織的表達(dá)來(lái)減輕大鼠腎組織損傷，防止腎功能惡化、延緩慢性腎衰進(jìn)展。

簡(jiǎn)介：J洳≥≥～唼博士學(xué)位論文⑧豫醫(yī)無(wú)毛小鼠的生物學(xué)特征及其分子遺傳學(xué)研究作者姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)章金濤方盛國(guó)教授動(dòng)物學(xué)所在學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院論文提交F1期2005年5月巾L習(xí)杭州浙江大學(xué)章金濤豫醫(yī)無(wú)毛小鼠的生物學(xué)特征及其分子遺傳學(xué)研究著年齡增長(zhǎng)變得異常而稀疏。并在突變基因?qū)隑ALB／C小鼠品系過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了一種嘴角脫毛的顯性表型小鼠，驗(yàn)證了遺傳的異質(zhì)性。電鏡掃描發(fā)現(xiàn)脫毛前毛囊上部的毛管先變大，然后再脫毛無(wú)毛同類系小鼠表面有較厚的一層鱗片狀角化物，毛囊腔寬大，部分毛囊內(nèi)含有一些能脫落到表面的角化樣碎片。35日齡無(wú)毛同類系小鼠可見(jiàn)明顯的包囊結(jié)構(gòu)，4月齡包囊增多、變大。3用RTPCR方法首次對(duì)昆明小鼠無(wú)毛基因的CDNA序列進(jìn)行了克隆，獲得了昆明小鼠無(wú)毛基因的全長(zhǎng)4014BPEGNA序列GENBANK登錄號(hào)AY547391，基因的CGS長(zhǎng)度為3546BP。AY547391基因編碼的蛋白質(zhì)在GENBANK中的序號(hào)為AAT45233，由I181個(gè)氨基酸組成。昆明小鼠與國(guó)外報(bào)導(dǎo)的小鼠、大鼠、豬、羊、猴、人等6種動(dòng)物CDS序列同源性分別為999％、944％、831％、781％、8L_9％、821％，氨基酸同源性分別是999％、922％、817％、708％、799％、801％。這一結(jié)果反應(yīng)了無(wú)毛基因在進(jìn)化過(guò)程中的高度保守性，表明其具有重要的生理功能。此外，還發(fā)現(xiàn)了4個(gè)SNP和一個(gè)缺失突變，其中3個(gè)位點(diǎn)沒(méi)有改變氨基酸殘基的性質(zhì)，兩個(gè)位點(diǎn)有氨基酸改變，并證實(shí)為多態(tài)性突變位點(diǎn)，研究結(jié)果為無(wú)毛基因的SNPS的數(shù)據(jù)庫(kù)提供了新的信息。并修正了國(guó)外報(bào)導(dǎo)的534位谷氨酸缺失為犀牛無(wú)毛表型病理性突變的錯(cuò)誤結(jié)論。4克隆獲得了豫醫(yī)無(wú)毛小鼠無(wú)毛基因的全長(zhǎng)4014BPCDNA序列GERDJANK登錄號(hào)AY547390。并證實(shí)了豫醫(yī)無(wú)毛小鼠表型是由于無(wú)毛基因R第12I“顯子上31LO位發(fā)生無(wú)義突變GA，導(dǎo)致911位的色氨酸被終止密碼子替代所引起，結(jié)合其犀牛狀、壽命短的特征。此突變基因被命名為RHINOCEROTICANDSHORTLIVED，符號(hào)為加刪；現(xiàn)己被小鼠基因組數(shù)據(jù)庫(kù)收錄。新無(wú)毛突變基因的發(fā)現(xiàn)擴(kuò)展了無(wú)毛突變數(shù)據(jù)庫(kù)，增加了對(duì)遺傳性脫發(fā)疾病中基因型和表現(xiàn)型相互關(guān)系的了解。由于豫醫(yī)無(wú)毛小鼠譜系清楚、遺傳機(jī)制明確，將是一種較有價(jià)值的動(dòng)物模型。關(guān)鍵詞小鼠；無(wú)毛基因；突變形態(tài)；組織學(xué)；超微結(jié)構(gòu)；同類系；克??；無(wú)毛小鼠；皮膚。2

簡(jiǎn)介：作者姓名劉薇學(xué)科專業(yè)普通外科學(xué)學(xué)院系、所湘雅醫(yī)院指導(dǎo)教師湯恢煥教授論文答辯日期型蘭’7．答辯委員會(huì)主席中南大學(xué)二。一一年五月U枝1從，。Ⅲ搿K缸噬盯磚僧RE甩，翟鬈Y麓，。1}，IR‘}原創(chuàng)性聲明?淵燃＼Y1917905所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲他單位的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明。作者簽名剮數(shù)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國(guó)家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。作者簽名童1墊導(dǎo)師簽名￡圣巫絲日期業(yè)年旦月衛(wèi)日

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多Fas信號(hào)激活樹(shù)突狀細(xì)胞炎性復(fù)合體形成的生物學(xué)意義與分子機(jī)制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多肺結(jié)核患者外周淋巴細(xì)胞亞群及協(xié)同刺激分子PD-1-PD-L1的表達(dá)特性與生物學(xué)意義.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：隨著我國(guó)水產(chǎn)加工業(yè)的發(fā)展，特別是魚(yú)糜制品產(chǎn)量的不斷增加，水產(chǎn)加工原料的品質(zhì)控制變得尤為重要。為了保護(hù)某些種群，確保食品生產(chǎn)嚴(yán)格遵照規(guī)范進(jìn)行，同時(shí)避免假冒現(xiàn)象，保護(hù)消費(fèi)者權(quán)益，水產(chǎn)制品中魚(yú)種的鑒別已經(jīng)成為消費(fèi)者和質(zhì)量檢測(cè)部門共同關(guān)注的熱點(diǎn)。鑒于魚(yú)糜制品水產(chǎn)加工程度較高，經(jīng)各工序如高溫、切割、添加調(diào)料和色素等處理后，已很難通過(guò)形態(tài)、味覺(jué)等常規(guī)感官鑒定方法對(duì)其魚(yú)種進(jìn)行準(zhǔn)確的辨別，而對(duì)于食品中原料成分的鑒定，我國(guó)至今還缺乏相關(guān)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。因此，必須盡快摸索建立一條有效、實(shí)用的魚(yú)種鑒定技術(shù)。本文探索了利，用分子生物學(xué)技術(shù)來(lái)檢測(cè)魚(yú)糜制品中原料魚(yú)種，通過(guò)PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法，對(duì)水產(chǎn)品MTDNA中的16SRRNA基因片段進(jìn)行測(cè)序，對(duì)魚(yú)種進(jìn)行鑒別。本文先對(duì)新鮮的活魚(yú)通過(guò)上面的方法進(jìn)行了鑒定，通過(guò)比對(duì)，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)所得序列與基因庫(kù)中的序列相吻合，說(shuō)明該法用于魚(yú)種鑒別是可行的。然后以食品學(xué)院自制的白鰱魚(yú)丸及超市購(gòu)買回來(lái)的含有兩種組分的鱈魚(yú)丸、章魚(yú)餅和國(guó)外蟹柳作為原料，采用普通酚氯仿抽提法進(jìn)行基因組DNA提取、選用16SRRNA基因作為目的基因，利用16SARL2510CGCCTGTTTATCAAAAACAT和16SBRH3080CCGGTCTGAACTCAGATCACGT兩條序列作為引物，對(duì)16SRRNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增、克隆、測(cè)序，從而獲得原料產(chǎn)品的16SRRNA基因部分片段序列，通過(guò)運(yùn)用BLAST。軟件，將16SRRNA部分片段序列和GENBANK中更多的序列進(jìn)行比較，找到相似性最高的序列，根據(jù)同源性理論，做出魚(yú)種鑒定。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，本文確立了魚(yú)糜制品基因組DNA的提取方法、優(yōu)化了PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系、PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件。對(duì)最終測(cè)序獲得的16SRRNA基因部分片段序列，運(yùn)用CLUSTWALW軟件進(jìn)行序列比對(duì)時(shí)發(fā)現(xiàn)自制白鰱魚(yú)丸的16SRRNA基因部分片段序列與白鰱肌肉的保持一致。而對(duì)于超市買回的魚(yú)糜制品含有豬肉和魚(yú)糜，運(yùn)用BLAST軟件，將獲得的序列與GENBANK中的序列進(jìn)行同源性比較時(shí)，結(jié)果顯示該產(chǎn)品中含有兩種組分，一種是名為鯛魚(yú)的成分，另外一種是豬肉組分。章魚(yú)餅中的章魚(yú)餡料為OCTOPUSVARIABILIS，產(chǎn)品符合產(chǎn)品說(shuō)明。國(guó)外蟹柳該產(chǎn)品含有鱈魚(yú)成分，與標(biāo)簽說(shuō)明一致。由以上結(jié)果說(shuō)明該法對(duì)于魚(yú)糜制品中的原料魚(yú)種的鑒定具有可行性。

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文光并行計(jì)算及其在圖像處理和計(jì)算分子生物學(xué)中的應(yīng)用姓名徐曉華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)計(jì)算機(jī)應(yīng)用技術(shù)指導(dǎo)教師陳崚20050301徐曉華光并行計(jì)算及其在圖像處理和計(jì)算分子生物學(xué)中的廊用ABSTRACTOPTICALPARALLELCOMPUTATIONHASADVANTAGESOFPRECISEDELAY，HI曲COMMUNICATIONSPEEDANDBANDWIDTH，HIGHRELIABILITYANDABILITYOFPROCESSINGLARGEAMOUNTOFDATASIMULTANEOUSLYINTHISTHESIS，WESTUDYOPTICALPARALLELCOMPUTINGANDPRESENTALGORITHMSFORIMAGEPROCESSINGMADCOMPUTATIONALMOLECULARBIOLOGYONTHEOPTICALBUSCOMPUTATIONALMODELNAMEDLARPBSLINEARARRAYWITHARECONFIGURABLEPIPELINEDOPTICALBUSSYSTEMWEFIRSTINTRODUCETHEOPTICALCOMPUTATIONALMODELLARPBSMADTHEPRIMITIVEOPERATIONSANDALGORITHMSOFMATRIXESMULTIPLICATION，SORTINGONTHEMODELINTHEAREAOFIMAGEPROCESSING，WEPRESENTFASTLARPBSALGORITLUNSOFHOUGHTRANSFORMANDEUCLIDEANDISTANCETRANSFORMINTHEAREAOFCOMPUTATIONALMOLECULARBIOLOGYWEPRESENTLARPBSALGORITHMSFORLONGESTCOMMONSUBSEQUENCEANDSEQUENCESALIGNMENTFORALLIMAGEWITH胛。胛PIXELSOLLRLARPBSHOUGHTRANSFORMALGORITHMCARLBECOMPLETEDIND1TIMEUSING卅∥PROCESSORSANDGETTHEOPTIMALSPEEDANDEFFICIENCYFORANIMAGEWITHN?！癙IXELSTHEFIRSTEDTALGORITHMONLARPBSCANBECOMPLETEDINO109NLOGLOGN／LOGLOGLOGN、TIMEUSING∥PROCESSORS，WHILEOURSECONDEDTALGORITHMCANCOMPUTETHEEDTIN0109NLOGLOGNTIMEUSINGON。／LOGLOGNPROCESSORSCOMPAREDWITHTHEBESTPARALLELEDTALGORITHMSONLARPBSREPORTEDSOFAR，OURALGORITHMSHAVETHELOWESTTIMEAREACOSTANDAREMOREEFFICIENTOURTHIRDALGORITHMCARLPROCESSEDTTRANSFORMINONLOGN／“LOGDNTIMEWITH“。馥國(guó)’C積PROCESSORS，WHEREC療，ANSARISFYLSC矸S以，L硪玎卸RESPECTIVELYBYSELECTINGDIFFERENTCNAND碳竹，THETIMECOMPLEXITYANDTHENUMBEROFPROCESSORSUSEDCANBEADJUSTEDTHISMAKESTHEALGORITHMHI曲LYSCALABLEANDFLEXIBLETHEALGORITHMISALSOAGENERALFRAMEWORKOFEDTALGORITHMSONLARPBS，MANYEXISTINGANDUNKNOWNPARALLELEDTALGORITHMSCALLBEDEDUCEDFROMTHISFRAMEWORK，PARTICULARLYIFWELETC“N，硪N月5THEALGORITHMCARLACCOMPLISHINO1TIMEWITH“2。PROCESSORS，THISISTHEMOSTEFFICIENTCONSTANTTIMEEDTALGORITHMFORTWOSEQUENCESOFLENGTHSMANDN，ONRALGORITHMUSESPPROCESSORSANDCOSTSOMN／P1COMPUTINGTIMEWHEREI墨P莖MAXM，“TIMEAREACOSTOFTHEALGORITHMIS

簡(jiǎn)介：河北醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文實(shí)驗(yàn)性脊髓空洞前狀態(tài)形成機(jī)制的分子生物學(xué)研究姓名李建峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師張慶俊20050401中文摘要空洞形成前期，對(duì)實(shí)驗(yàn)性家兔脊髓空洞前狀態(tài)的血一脊髓屏障結(jié)構(gòu)和功能變化進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1術(shù)后動(dòng)物神經(jīng)功能改變按改良的TARLOV評(píng)分法對(duì)動(dòng)物進(jìn)行行為學(xué)觀察，KAOLIN組動(dòng)物于術(shù)后第7天出現(xiàn)明顯神經(jīng)功能障礙25土036，并隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸加重，與對(duì)照組和假手術(shù)組對(duì)比有顯著差異P005。同時(shí)SCEP神經(jīng)電生理測(cè)定結(jié)果顯示KAOLIN組動(dòng)物于術(shù)后第3天即出現(xiàn)潛伏期延長(zhǎng)422士012MS，波幅降低，并隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸加重，與對(duì)照組和假手術(shù)組對(duì)比有顯著差異P00502脊髓含水量測(cè)定結(jié)果顯示，KAOLIN組動(dòng)物于術(shù)后第1天脊髓含水量6835士070較對(duì)照組即有明顯增加，第7天達(dá)到高峰7292士08621天時(shí)稍有緩解7003士077，但仍高于對(duì)照組P005F檢驗(yàn)。3EVANSBLUE法測(cè)定脊髓組織中的EB含量，與對(duì)照組相比，KAOLIN組動(dòng)物于術(shù)后第3天脊髓EB含量開(kāi)始明顯增加279T042PGML第7天達(dá)到高峰353士045RGML，并持續(xù)到21天336士027LIGMLP005，F(xiàn)檢驗(yàn)。4脊髓空洞前狀態(tài)中上頸髓病理變化，生理鹽水組和假手術(shù)組動(dòng)物脊髓神經(jīng)元輪廓正常，核及核仁清楚，胞漿內(nèi)尼氏體分布均勻，神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、血管周圍間隙正常。KAOLIN組動(dòng)物于術(shù)后第3天出現(xiàn)細(xì)胞、血管周圍間隙增寬，表現(xiàn)為輕度水腫第7天、14天水腫程度加重，核膜、核仁稍顯模糊，神經(jīng)元胞體內(nèi)尼氏體減少，膠質(zhì)細(xì)胞增生，中央管飽滿，中央管室管膜細(xì)胞受壓變平，管周組織疏松，呈明顯水腫改變，蛛網(wǎng)膜F腔可見(jiàn)KAOLIN沉積，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。第21天水腫稍顯減輕，但持續(xù)存在，胞漿空泡出現(xiàn)，前角細(xì)胞數(shù)量減少，膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯，中央管張力增加，室管膜上皮斷裂、脫落，可見(jiàn)KAOLIN肉芽腫形成。5、脊髓空洞前狀態(tài)中上頸髓超微結(jié)構(gòu)電鏡觀察，KAOLIN組動(dòng)物于術(shù)后2周內(nèi)基膜尚平滑完整，緊密連接結(jié)構(gòu)正常，主要為神經(jīng)組織細(xì)胞的缺血水腫，細(xì)胞組織間隙增寬，程度隨時(shí)間的延長(zhǎng)而加重，出現(xiàn)線粒體腫脹、崩解尼氏體破壞、表面顆粒減少血管周圍間隙增寬等21天可見(jiàn)上述病變加重，并且出現(xiàn)髓鞘板層狀結(jié)構(gòu)松解、斷裂，呈脫髓鞘改變，甚至軸索破壞。上述結(jié)果提示，脊髓空洞前狀態(tài)作為脊髓空洞癥的早期階段，在脊髓神經(jīng)電生理傳導(dǎo)功能上即發(fā)生變化，早于臨床癥狀的出現(xiàn)其組織學(xué)上主要表現(xiàn)為脊髓缺血水腫，其中早期主要為血管源性水腫，隨后伴有間質(zhì)性