重組EGFP慢病毒載體示蹤轉(zhuǎn)染的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合β-磷酸三鈣移植治療免股骨頭缺損性壞死的研究.pdf

1、目的：
　　 探討重組增強(qiáng)型綠色螢光蛋白(EGFP)慢病毒載體示蹤轉(zhuǎn)染的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells，UC-MSCs)聯(lián)合β-磷酸三鈣移植修復(fù)兔股骨頭缺損性壞死的效果研究，探討治療臨床股骨頭壞死治療的新途徑。
　　 方法：
　　 UC-MSCs體外培養(yǎng)增殖，骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)基因質(zhì)粒與攜帶重組增強(qiáng)型綠色螢光蛋白(EGFP)慢病毒載體的構(gòu)

2、建，組合BMP-2基因質(zhì)粒與攜帶重組增強(qiáng)型綠色螢光蛋白(EGFP)的慢病毒載體與臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSCs)共培養(yǎng)；24只新西蘭大白兔隨機(jī)分為2組制作兔股骨頭缺損模型，每組12只，A組為骨缺損填充β-磷酸三鈣組B組為骨缺損填充重組增強(qiáng)型綠色螢光蛋白(EGFP)慢病毒載體示蹤轉(zhuǎn)染的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSCs)+β-磷酸三鈣組；植入術(shù)后2，4，6，8周時(shí)2組分別處死3只新西蘭大白兔，并分別對(duì)股骨頭行MRI影像學(xué)和股骨頭標(biāo)本取材行

3、股骨頭大體觀察，HE染色病理學(xué)及新生骨小梁面積百分比測(cè)定。
　　 結(jié)果：
　　 股骨頭大體觀察，MRI和HE病理組織學(xué)檢查顯示術(shù)后4周時(shí)B組骨缺損處β-磷酸三鈣逐步降解，有明顯的成骨反應(yīng)和新骨形成，股骨頭關(guān)節(jié)軟骨未脫落，股骨頭未塌陷，8周時(shí)β-磷酸三鈣基本完全降解，股骨頭的骨缺損區(qū)基本修復(fù)完全，股骨頭軟骨缺損少量軟骨缺損，股骨頭未塌陷；A組4周時(shí)股骨頭骨缺損為β-磷酸三鈣填逐步降解并有少量纖維組織填充，股骨頭軟骨脫落，骨

4、頭缺損區(qū)周圍骨質(zhì)硬化，骨密度增加。8周時(shí)股骨頭缺損區(qū)β-磷酸三鈣基本降解，骨缺損周圍骨質(zhì)硬化，股骨頭骨小梁紊亂，股骨頭變形并塌陷。
　　 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：利用計(jì)算機(jī)軟件計(jì)算術(shù)后8周的骨缺損區(qū)骨小梁面積百分比值，對(duì)其進(jìn)行面積百分比均值的t檢驗(yàn)，過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明，具有方差齊性，P<0.05.總體有差別，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 重組重組增強(qiáng)型綠色螢光蛋白(EGFP)慢病毒載體示蹤轉(zhuǎn)染的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UCB-