Darbufelone對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響及其機(jī)制.pdf

1、目的：觀察COX-2/5-LOX雙重抑制劑darbufelone對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖、凋亡的影響；檢測(cè)darbufelone對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞線粒體膜電位、活性氧及凋亡相關(guān)因子的影響，初步探討darbufelone誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡可能的機(jī)制；觀察COX-2和5-LOX蛋白質(zhì)在人胃癌組織中的表達(dá)情況。 方法：MTT法檢測(cè)darbufelone對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖的影響；TUNEL法檢測(cè)胃

2、癌細(xì)胞的凋亡指數(shù)；RT-PCR法檢測(cè)加藥前后COX-2、5-LOX、Bax、Bcl-2和caspase-3 mRNA的變化；免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)COX-2、5-LOX、Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白質(zhì)的變化；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞活性氧和線粒體膜電位變化；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)人胃癌組織及相匹配的癌旁正常組織中COX-2和5-LOX蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。 結(jié)果：Darbufelone抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖，其24、48

3、、72 h半數(shù)細(xì)胞抑制率所需藥物濃度分別為6.1×10-5、5.0×10-5、3.0×10-5 mol·L-1；1.5×10-5、1.0×10-5和5×10-6 mol·L-1 darbufelone作用SGC-7901細(xì)胞72 h后，細(xì)胞凋亡率分別為（30.3±2.1）％、（23.0±2.0）％和（15.0±1.5）％，均顯著高于對(duì)照組（0.6±0.1）％，（P<0.01）；1.5×10-5 mol·L-1 darbufelone處理

4、胃癌SGC-7901細(xì)胞72 h后，Bcl-2、5-LOX、COX-2、caspase-3、Bax mRNA的相對(duì)表達(dá)量分別為0.13±0.01、0.21±0.02、0.29±0.02、0.38±0.03、0.27±0.03，分別與對(duì)照組（0.27±0.02、0.78±0.05、0.63±0.05、0.12±0.02、0.16±0.02）比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；1.5×10-5 mol·L-1 darbufelone作

5、用胃癌SGC-7901細(xì)胞72 h后，Bcl-2、5-LOX、COX-2、caspase-3、Bax蛋白質(zhì)的AOD值分別為0.15±0.01、0.09±0.01、0.12±0.01、0.33±0.03、0.25±0.01，分別與對(duì)照組（0.29±0.02、0.34±0.03、0.38±0.04、0.09±0.02、0.12±0.02）比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；1.5×10-5 mol·L-1 darbufelone作用胃

6、癌SGC-7901細(xì)胞72 h后，細(xì)胞內(nèi)活性氧顯著增多，線粒體膜電位顯著下降；胃癌組織中5-LOX蛋白質(zhì)的AOD值為0.42±0.14，顯著高于其在癌旁組織中的AOD值（0.22±0.10），（P<0.05）；胃癌組織COX-2蛋白質(zhì)的AOD值為0.39±0.12，顯著高于其在癌旁組織中的AOD值（0.19±0.08），（P<0.05）。 結(jié)論：Darbufelone可抑制胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)其凋亡。Darbufe