胸膜肺炎放線桿菌四川分離株的生物學(xué)特性研究.pdf

1、胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae，APP)能夠引起豬患傳染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia，PCP)，給我國(guó)乃至全球養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了重大損失。本研究進(jìn)行了APP的分離鑒定及其生物學(xué)特性研究，主要研究如下:
　　從來(lái)自四川廣安、眉山等地區(qū)疑似病料中進(jìn)行APP分離，經(jīng)分離培養(yǎng)、溶血現(xiàn)象、“衛(wèi)星，現(xiàn)象、染色鏡檢、PCR、生化特性等鑒定，共分離獲得

2、9株胸膜肺炎放線桿菌（分別命名為SC-GA、SC-MS1～SC-MS8）。對(duì)分離株進(jìn)行PCR鑒定均能擴(kuò)增出大小約422bp的目的條帶;對(duì)分離株分別提取酚水抗原同標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清做瓊擴(kuò)血清型鑒定，分離自廣安病豬關(guān)節(jié)積液的SC-GA株為血清7型，分離自眉山病豬的脾臟SC-MS5株、肺臟SC-MS1、SC-MS2、SC-MS3、SC-MS4、SC-MS6、SC-MS7、SC-MS8等7株均為血清1型。
　　分別對(duì)9株分離株進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)的

3、研究，結(jié)果表明9株分離株均對(duì)慶大霉素、卡那霉素、四環(huán)素、林可霉素、紅霉素耐藥;均對(duì)諾氟沙星、環(huán)丙沙星等喹諾酮類(lèi)，頭孢唑林、頭孢哌酮/舒巴坦等頭孢類(lèi)，以及氟苯尼考、阿莫西林等敏感;除SC-GA外，其他分離株均對(duì)青霉素G敏感;除SC-GA、SC-MS1外，其他分離株均對(duì)氨芐西林敏感;SC-GA對(duì)青霉素G、氨芐西林耐藥。本研究揭示臨床對(duì)APP的預(yù)防和治療用藥，應(yīng)選擇青霉素類(lèi)、頭孢類(lèi)、喹諾酮類(lèi)等，避免使用氨基糖苷類(lèi)和大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物。
　　

4、對(duì)分離株之間毒力大小進(jìn)行比較研究，發(fā)現(xiàn)血清1型分離株毒性明顯比7型分離株強(qiáng)，且1型分離株之間毒性也有較大差異。選取一株毒性最強(qiáng)1型分離株(SC-MS5)和一株血清7型分離株(SC-GA)分別進(jìn)行了毒力測(cè)定研究。測(cè)定分離株對(duì)小鼠的半數(shù)致死量，并觀察對(duì)小鼠的致病性。研究結(jié)果表明SC-MS5株和SC-GA株對(duì)小鼠均有較強(qiáng)的致病性，其中SC-MS5株的半數(shù)致死量為5.4378×107CFU，SC-GA株的半數(shù)致死量為1.9543×108CFU。

5、2株分離株均能引起小鼠產(chǎn)生明顯的胸膜肺炎癥狀及病理變化:呼吸困難、精神萎靡;肺臟出血、粘連，脾臟淤血腫大等。
　　利用SC-MS51型株和SC-GA7型株制備滅活苗對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，免疫結(jié)束后14d對(duì)小鼠進(jìn)行10LD50攻毒。檢測(cè)首免前、二免前、攻毒前血清的抗體水平，發(fā)現(xiàn)免疫后血清抗體水平明顯上升，且二免后上升明顯。在對(duì)小鼠的保護(hù)方面，SC-GA7型分離株滅活苗對(duì)自身的免疫保護(hù)率為66.7％，SC-MS51型分離株滅活苗對(duì)自身的免疫