CTLA-4基因多態(tài)性與反復(fù)自然流產(chǎn)(RSA)的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、第一部分
　　 目的:本研究對(duì)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)性抗原-4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4，CTLA-4）基因SNP-1722（T/C）、SNP-1661（A/G）、SNP-318（C/T）和SNP+49（A/G）四個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行分析，探討CTLA-4基因四個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與寧夏漢族反復(fù)自然流產(chǎn)（RSA）的相關(guān)性，研究CTLA-4基因四個(gè)SNP位點(diǎn)構(gòu)建的單倍型與反復(fù)自然流

2、產(chǎn)的關(guān)聯(lián)性。
　　 方法:選取2006年1月-2009年7月在寧夏醫(yī)科大學(xué)生殖與遺傳實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行染色體檢查的反復(fù)自然流產(chǎn)者242例做為病例組，年齡19-42歲，平均年齡為27.97±4.49歲；選取2008年1月-2009年8月在銀川市婦幼保健院住院分娩的正常孕婦228例做為對(duì)照組，年齡20-36歲，平均年齡為27.67±3.67歲。用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性（polymerase chain reaction-rest

3、ricted fragment length polymorphism，PCR-RFLP）技術(shù)檢測(cè)病例組與對(duì)照組CTLA-4基因四個(gè)位點(diǎn)多態(tài)性。SPSS11.5軟件計(jì)算基因型頻率，等位基因頻率及比值比（OR），比較各組基因型頻率和等位基因頻率及進(jìn)行相對(duì)危險(xiǎn)度的估計(jì)，分析CTLA-4基因四個(gè)SNPs位點(diǎn)與反復(fù)自然流產(chǎn)的相關(guān)性，SHEsis軟件構(gòu)建單倍型探討CTLA-4基因四個(gè)SNPs位點(diǎn)與反復(fù)自然流產(chǎn)的易感性是否有關(guān)聯(lián)。
　　 結(jié)

4、果:①經(jīng)遺傳平衡定律檢驗(yàn)，研究對(duì)象CTLA-4各基因型頻率分布均符合Hardy-Weinberg平衡法則，具有群體代表性。②CTLA-4基因SNP-1722、SNP-1661、SNP+49位點(diǎn)各基因型頻率和等位基因頻率在病例組與對(duì)照組中的分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；CTLA-4基因SNP-318（C/T）的CC基因型在病例組中的分布頻率明顯高于對(duì)照組，CT基因型在病例組中的分布頻率明顯低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.003

5、，OR=1.941；P=0.007，OR=0.546），而TT基因型在病例組和對(duì)照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.345，OR=0.237）；卡方檢驗(yàn)后，C等位基因在病例組中的頻率明顯高于對(duì)照組，而T等位基因在病例組中的頻率明顯低于對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.002，OR=1.853；P=0.002，OR=0.540）。③CTLA-4基因四個(gè)SNPs位點(diǎn)之間兩兩連鎖不平衡（D’>0.8）。④CTLA-4基因SNP-1722、S

6、NP-1661、SNP-318和SNP+49四個(gè)位點(diǎn)構(gòu)建的單倍型中有9種保護(hù)性單倍型在病例組與對(duì)照組中具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05，OR<1）；2種危險(xiǎn)致病單倍型在兩組中的分布具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05，OR>1）。
　　 結(jié)論:1、CTLA-4基因SNP-1722、SNP-1661、SNP+49多態(tài)性位點(diǎn)各基因型頻率和等位基因頻率在病例組與對(duì)照組中的分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與寧夏漢族女性反復(fù)自然流產(chǎn)的易感性無關(guān)。2、CTLA-

7、4基因SNP-318多態(tài)性與反復(fù)自然流產(chǎn)可能有一定的關(guān)聯(lián)性，其CC、CT基因型可能是寧夏漢族女性反復(fù)自然流產(chǎn)的易感因素，同時(shí)攜帶T等位基因的個(gè)體發(fā)生反復(fù)自然流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)明顯降低。3、CTLA-4基因四個(gè)SNPs位點(diǎn)兩兩之間連鎖不平衡。4、CTLA-4基因構(gòu)建的單倍型中，有9種單倍型很可能是寧夏漢族女性反復(fù)自然流產(chǎn)的保護(hù)性因素，2種單倍型可能是寧夏漢族女性反復(fù)自然流產(chǎn)的危險(xiǎn)性因素。
　　 第二部分
　　 目的:研究細(xì)胞毒性T

8、淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原-4（CTLA-4）基因啟動(dòng)子區(qū)SNP-1722（T/C）、SNP-1661（A/G）、SNP-318（C/T）和第一外顯子SNP+49（A/G）四個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)在寧夏回族-漢族群體中的基因型頻率和等位基因頻率分布特征。
　　 方法:來源于寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院健康體檢者，回族208人（回族女性119人，回族男性89人），漢族317人（漢族女性223人，漢族男性94人），平均年齡（24.42±3.69）歲。均無慢性病

9、史、無放射和化學(xué)藥物治療史、無自身免疫性疾病史，祖籍為寧夏的回族和漢族群體。應(yīng)用PCR–RFLP技術(shù)對(duì)寧夏回族和漢族群體CTLA-4基因啟動(dòng)子區(qū)SNP-1722（T/C）、SNP-1661（A/G）、SNP-318（C/T）位點(diǎn)及第一外顯子區(qū)SNP+49（A/G）位點(diǎn)分布進(jìn)行檢測(cè)。SPSS11.5軟件計(jì)算基因型頻率及等位基因頻率，比較回-漢群體基因型頻率和等位基因頻率的差異，分析CTLA-4基因四個(gè)SNPs位點(diǎn)在寧夏回族-漢族群體中分布

10、特征。
　　 結(jié)果:寧夏回族與漢族群體的CTLA-4基因SNP-1722、SNP-1661、SNP-318、SNP+49位點(diǎn)基因型頻率及等位基因頻率比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。合并寧夏回漢族群體，按性別重新分組后比較，顯示CTLA-4基因SNP-1661，SNP-318，SNP+49三個(gè)位點(diǎn)基因型頻率及等位基因頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而CTLA-4基因SNP-1722位點(diǎn)TT、TC和CC基因型頻率在性

11、別組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=9.280，P=0.010），其中CC基因型頻率女性明顯高于男性（16.08％vs7.11％，χ2=8.523，P=0.004），C等位基因頻率從女性與男性的比較的P值看差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.162，P=0.141），但是顯示C等位基因含量具有女性較男性高。
　　 在國內(nèi)不同地區(qū)之間CTLA-4基因SNP-1722、SNP-1661、SNP-318、SNP+49位點(diǎn)基因型頻率及等位基因頻率分布