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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
應(yīng)用RNA干擾技術(shù)抑制肝癌細(xì)胞株MHCC97H和Huh-7中FAT10基因的表達(dá),探討FAT10基因表達(dá)下降,對(duì)人肝細(xì)胞癌細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響。為進(jìn)一步研究肝癌的侵襲和轉(zhuǎn)移機(jī)制提供理論依據(jù)。
方法:
1、將針對(duì)FAT10基因設(shè)計(jì)的siRNA序列瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至人肝細(xì)胞癌MHCC97H和Huh-7細(xì)胞,運(yùn)用半定量RT-PCR、熒光定量PCR和western blot檢測(cè)FAT10mRNA和蛋
2、白的表達(dá)變化。
2、利用transwell侵襲實(shí)驗(yàn)、transwell遷移實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn),觀察降低FAT10基因表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞MHCC97H和Huh7體外侵襲和遷移能力的影響。
結(jié)果:
1、將siRNA轉(zhuǎn)染至肝癌MHCC97H和Huh-7細(xì)胞,通過半定量RT-PCR和熒光定量PCR檢測(cè)FAT10 mRNA表達(dá)明顯下調(diào)。
2、將siRNA轉(zhuǎn)染至肝癌MHCC97H和Huh-7細(xì)胞,通過
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