GIGYF2基因突變分析.pdf

1、帕金森?。≒arkinson's Disease，PD）是一種常見(jiàn)的神經(jīng)變性性疾病，臨床表現(xiàn)主要為靜止性震顫、肌強(qiáng)直、運(yùn)動(dòng)遲緩、姿勢(shì)步態(tài)異常等，病理以黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的喪失和路易氏小體形成為特點(diǎn)，發(fā)病年齡多在60歲以上。其發(fā)病率隨年齡的增加而增高，65歲以上老年人群患病率為1％～2％。PD的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，可能與遺傳缺陷、氧化應(yīng)激與線(xiàn)粒體缺陷、興奮性氨基酸毒性作用、環(huán)境毒素作用等多種因素相關(guān)。流行病學(xué)調(diào)查顯示，約10-15％的PD患

2、者有家族史。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，遺傳因素在PD發(fā)病機(jī)制中的作用越來(lái)越受到關(guān)注。研究已發(fā)現(xiàn)15個(gè)染色體定位與帕金森病相關(guān)，11個(gè)致病基因已被克隆，其中4個(gè)呈常染色體顯性（Autosomal dominant，AD）遺傳，6個(gè)呈常染色體隱性（Autosomal recesive，AR）遺傳，1個(gè)與遲發(fā)性PD相關(guān)。2003年Nathan Pankratz等對(duì)150個(gè)美國(guó)PD家系進(jìn)行連鎖分析時(shí)定位了一個(gè)與PD致病相關(guān)基因PARK11，位于2q

3、36-37。GIGYF2（GRB10-INTERACTING GYF PROTEIN2）基因在人類(lèi)基因中定位于2q36.1，是PARK11的候選基因。2008年Lautier C等在意大利和法國(guó)家族性PD人群中首次進(jìn)行了GIGYF2基因突變分析，發(fā)現(xiàn)7個(gè)點(diǎn)突變，突變頻率為4.8％。此后多個(gè)研究組又發(fā)現(xiàn)5個(gè)新的突變，在不同PD人群中GIGYF2基因突變頻率有所不同。目前尚沒(méi)有針對(duì)歐美以外人群進(jìn)行的GIGYF2基因突變檢測(cè)。 目的:

4、 建立運(yùn)用DNA直接測(cè)序技術(shù)檢測(cè)GIGYF2基因突變的技術(shù)平臺(tái)，對(duì)中國(guó)散發(fā)性遲發(fā)性PD患者進(jìn)行GIGYF2基因突變篩查，明確該基因在中國(guó)人群中的突變特點(diǎn)。 方法: 應(yīng)用PCR技術(shù)結(jié)合DNA直接測(cè)序方法對(duì)中國(guó)300例散發(fā)遲發(fā)性PD患者進(jìn)行GIGYF2基因所有27個(gè)外顯子及內(nèi)外顯子交界區(qū)30bp內(nèi)的突變分析，對(duì)發(fā)現(xiàn)的新堿基位點(diǎn)改變，應(yīng)用DNA直接測(cè)序技術(shù)在200例正常對(duì)照中進(jìn)行分析，辨別是突變還是多態(tài)。 結(jié)果

5、: 成功對(duì)300例中國(guó)散發(fā)遲發(fā)性PD患者進(jìn)行了GIGYF2基因突變分析，與dbSNP數(shù)據(jù)庫(kù)及相關(guān)文獻(xiàn)比較，共發(fā)現(xiàn)8個(gè)新的堿基改變，分別是：c.G766A， c.C1130A， c.C1417T， c.C1555T， c.GG1474-1475AA，c.C1738A，c.C2935T，c.G3208C，在200例正常對(duì)照組的DNA直接測(cè)序結(jié)果中均未發(fā)現(xiàn)這8個(gè)堿基改變，推測(cè)可能為新的突變。GIGYF2基因在中國(guó)漢族散發(fā)性遲發(fā)型PD人

6、群中的突變頻率為2.7％。本組PD人群中未發(fā)現(xiàn)dbSNP數(shù)據(jù)庫(kù)及相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的已知突變。 結(jié)論: 1建立了應(yīng)用DNA直接測(cè)序診斷GIGYF2基因突變的檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)； 2發(fā)現(xiàn)8個(gè)新的GIGYF2基因突變位點(diǎn)，分別為：c.G766A，c.C1130A， c.C1417T， c.C1555T， c.GG1474-1475AA， c.C1738A，c.C2935T，c.G3208C，GIGYF2基因在中國(guó)漢族散發(fā)性遲發(fā)型