中國(guó)人CYP1A2基因多態(tài)性及其與酶活性和茶堿藥動(dòng)學(xué)的相關(guān)性研究.pdf

1、一、目的 本試驗(yàn)擬在發(fā)掘中國(guó)人CYPlA2新的基因多態(tài)性位點(diǎn)的基礎(chǔ)上研究基因多態(tài)性對(duì)酶活性的影響及對(duì)茶堿體內(nèi)代謝的影響，從而為臨床合理用藥提供依據(jù)。 二、方法 1．CYPlA2表型和基因型相關(guān)性研究422名健康受試者，空腹口服100 mg咖啡因后，以服藥5h后血漿中咖啡因代謝產(chǎn)物1，7．二甲基黃嘌呤與咖啡因比值(17X／137X)來(lái)表示CYPlA2酶活性。PCR基因擴(kuò)增直接測(cè)序和PCR-RFLP對(duì)422名

2、受試者進(jìn)行基因分型。分析酶活性和基因型的關(guān)系。 2．CYPlA2基因多態(tài)性與茶堿藥動(dòng)學(xué)相關(guān)性研究 在422名受試者中篩選出基因序列已知的37名受試者(36名男性，1名女性)，基因型分別為G-3860A(CYPlA2<'*>1C)、G-3113A、A-164C(CYPlA2<'*>1C)、T5347C?？崭箍诜?00 mg氨茶堿片后采集血樣，測(cè)定不同時(shí)間茶堿血藥濃度，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。分析不同基因型受試者茶堿藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的差異

3、。 三、結(jié)果 1．在-2467位點(diǎn)附近，鑒定了13個(gè)SNP的基因多態(tài)性。常見(jiàn)的5個(gè)標(biāo)簽性位點(diǎn)-3860A、-3594G、-3113A、-164C和5347T的突變頻率分別是0.21、0.15、0.10、0.36和0.14。 2.發(fā)現(xiàn)了新的功能性SNP,G-3113A?；蛐蜑?3113A/A的個(gè)體酶活性顯著低于基因型為-3113G/A(p=0.096)和-3113G/G型(p=0.038.)的酶活性。酶活性分別是

4、-0.45士0.05(LgMR,Mean±SD),-0.32±0.16以及-0.29士0.16。 3.構(gòu)建了中國(guó)人群CYP1A2基因單倍體構(gòu)型,單倍體13和15的酶活性相差1.92倍(95[％]的可信區(qū)間是:1.13～2.71),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.016)。攜帶-3113G/A基因型的單倍體5、8和12酶活性比攜帶基因型為-3113G/G型的單倍體10、9、15酶活性顯著降低。而單倍體5、9、12酶活性比單倍體13酶活性

5、低(p值分別是0.034、0.020和0.037)。 4.本試驗(yàn)聯(lián)合其它的功能性位點(diǎn)進(jìn)行研究,未發(fā)現(xiàn)文獻(xiàn)報(bào)道的功能性SNP G-3860A和C-164A對(duì)茶堿體內(nèi)代謝有影響。 5.基因型為-3113G/G、-3113G/A、-3113A/A的個(gè)體茶堿AUC<,0-∞>分別是109.2±22.9μg.h.mL<'-1>、113.9±25.6μg.h.mL<'-1>及127.7士23.9μg.h.mL<'-1>,A/A型茶堿

6、體內(nèi)代謝顯著減慢(p<0.001,與G/G型比較)。5347T/T、5347C/C型個(gè)體茶堿AUC<,0-t>分別是92.84±13.1 μg.h.mL<'-1>、114.6士23.2μg.h.mL<'-1>,T/T基因型個(gè)體茶堿體內(nèi)代謝加快。 四、結(jié)論 1.CYP1A2 G-3113A位點(diǎn)多態(tài)性和中國(guó)人CYP1A2低酶活性相關(guān)。 2．考察CYP1A2基因的功能時(shí)需考慮單倍體構(gòu)型。 3. -3113A／