小肽、糖類的毛細管電泳分離研究.pdf

1、毛細管電泳(CE)是在電泳技術和色譜技術的基礎上發(fā)展起來的一種分離技術，它具有快速、高效、樣品用量少的特點，能用于多種化合物的分離，如氨基酸、肽、蛋白質、甚至整個細胞和病毒顆粒，顯示了其獨有的優(yōu)勢。此外，毛細管電泳的分離模式靈活多變，方法較為容易，而且操作費用低。 毛細管電泳的分支--非水毛細管電泳(nonaqueouscapillaryelectrophoresis，NACE)，具有毛細管電泳的優(yōu)點，相對于水相毛細管電泳，擁有

2、自己獨特的特點與優(yōu)勢。其研究范圍逐漸擴大，包括多肽、無機離子、聚糖、中性物質、其代謝物的分離等，涵蓋了分析應用和基礎研究兩個方面。由于很多非水溶液的物理性質還不很清楚，并且有機試劑的數(shù)目繁多，這些問題給試劑的選擇帶來一定的困難。今后一段時間研究重點應該是對溶劑系統(tǒng)選擇的規(guī)律和優(yōu)化方法的研究。 糖廣泛存在于自然界和生物體中，一直以來人們認為糖主要是提供能量，但是新興的糖生物化學研究表明糖類物質還有其它多方面的生物活性與功能。多肽是

3、生命科學中重要的生物大分子物質，是生物體實現(xiàn)其功能的物質基礎。多肽、糖類是生命有機體的重要組成部分，研究其毛細管電泳分離對醫(yī)藥、生物、食品、衛(wèi)生等領域具有重要意義。 目前，紫外檢測仍是CE中最常用的檢測手段，對于肽類和糖類大多數(shù)沒有或只有微弱的紫外吸收，直接紫外檢測滿足不了低含量組分測定的要求，化學衍生化法應運而生。本文采用實驗室自行合成的新型衍生化試劑，改變被測化合物的特性，進行了肽類物質和糖類物質的毛細管電泳分離，結果令人滿

4、意。 論文分三章： 第一章 簡單介紹了毛細管電泳的發(fā)展及其在醫(yī)學藥物、生命科學、生物技術、法醫(yī)科學等領域的應用，并對CE分離被分析物的策略及相關基礎知識進行了闡述。 第二章 非水毛細管電泳對小肽衍生物的分離研究，包括兩部分： 2.1采用咔唑-9-乙基氯甲酸酯(CEOC)作為柱前衍生試劑，采用乙酸-乙酸銨為電解質，甲醇和乙腈混合液為有機溶劑對小肽衍生物進行了分離，實現(xiàn)了4種小肽的基線分離。

5、 2.2采用新型衍生試劑2-(11H-苯[a]咔唑)乙基氯甲酸酯(BCEC-C1)作為柱前衍生試劑，在甲醇和乙腈為溶劑，乙酸-乙酸銨為緩沖體系，毛細管毛細管柱長58.5cm(有效長度50cm)，20℃，30kV，壓力進樣8s，279nm二極管陣列檢測(DAD)條件下，采用非水毛細管電泳模式考察了小肽衍生物的分離條件，實現(xiàn)了5種小肽的基線分離。 第三章 以1-氨基蒽為衍生試劑，采用毛細管區(qū)帶電泳模式考察并優(yōu)化了糖類衍