火麻仁木脂素酰胺的抗神經(jīng)炎癥活性研究.pdf

1、目前，神經(jīng)退行性疾?。ò柎暮Ｄ。两鹕『投喟l(fā)性硬化等）的發(fā)病率越來越高并趨于低齡化。這些疾病的發(fā)生、發(fā)展與氧化損傷、免疫炎癥、線粒體功能性障礙、興奮性毒素和細(xì)胞凋亡等機(jī)制有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中，小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥相關(guān)反應(yīng)起著非常重要作用。細(xì)胞性毒素、化學(xué)、物理刺激等均會(huì)激活小膠質(zhì)細(xì)胞，并釋放大量的炎癥因子，加劇炎癥反應(yīng)。小膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)神經(jīng)炎癥的發(fā)生并活化很多相關(guān)信號(hào)通路，比如:Toll樣受體，JAK/S

2、TAT，NF-κB和MAPK等。其中NF-κB是介導(dǎo)炎癥發(fā)生的重要信號(hào)通路，NF-κB的激活會(huì)誘導(dǎo)產(chǎn)生大量的炎癥細(xì)胞因子，炎癥因子反過來刺激細(xì)胞，使細(xì)胞發(fā)生持續(xù)的激活，進(jìn)而控制大量細(xì)胞因子的基因表達(dá)。在小膠質(zhì)細(xì)胞激活過程中，NF-κB會(huì)與其他炎癥相關(guān)通路共同作用，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。所以，發(fā)現(xiàn)有效的控制NF-κB信號(hào)通路活化的化合物將有望成為神經(jīng)退行性相關(guān)疾病治療的潛在方法。
　　火麻仁提取物在神經(jīng)保護(hù)方面具有較好的活性，本課題組前期對(duì)

3、火麻仁進(jìn)行了化學(xué)成分研究，獲得了一系列木脂素酰胺類化合物。本論文通過建立脂多糖(LPS)刺激BV2小膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)炎癥模型，對(duì)這些化合物進(jìn)行了抗炎活性篩選，并對(duì)篩選出的活性化合物grossamide、cannabisin F是否抑制LPS引起的NF-κB信號(hào)通路的激活進(jìn)行研究，以發(fā)現(xiàn)其通過NF-κB信號(hào)通路干預(yù)來治療神經(jīng)炎癥相關(guān)疾病的潛力。
　　研究結(jié)果表明grossamide表現(xiàn)出潛在的抗炎活性。ELISA及qRT-PCR結(jié)果顯

4、示grossamide可以抑制LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞的炎癥因子IL-6和TNF-α的表達(dá)。Western blot和免疫熒光等檢測(cè)結(jié)果顯示grossamide可以抑制IκBα及NF-κBp65蛋白的磷酸化，阻止NF-κ Bp65表達(dá)入核，同時(shí)阻止了NF-κB上游蛋白TLR4及MyD88的表達(dá)。說明grossamide可以通過抑制TLR4介導(dǎo)的NF-κB的信號(hào)通路起到保護(hù)小膠質(zhì)細(xì)胞的作用。
　　研究結(jié)果表明cannabisin F同

5、樣表現(xiàn)出抗炎能力。細(xì)胞內(nèi)活性氧檢測(cè)結(jié)果顯示cannabisin F可以抑制BV2細(xì)胞產(chǎn)生ROS。Western blot結(jié)果顯示cannabisinF可以促進(jìn)SIRT1，Nrf-2及下游蛋白HO-1的表達(dá)，同時(shí)可以抑制IκBα及NF-κBp65蛋白的磷酸化表達(dá)。ELISA及RT-PCR的結(jié)果顯示cannabisin F可以抑制LPS刺激BV2細(xì)胞產(chǎn)生的炎癥因子IL-6和TNF-α的表達(dá)。說明cannabisin F可通過激活SIRT1/