基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的二丁顆粒中活性成分分析及其含量測定.pdf

1、目的：探討二丁顆粒對高尿酸血癥小鼠的影響；采用高效液相色譜-四極桿-飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜法（UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS）對二丁顆粒水提取物的主要化學成分及血中移行成分進行分析鑒定；建立HPLC法同時測定二丁顆粒(紫花地丁、蒲公英、板藍根和半邊蓮)中的單咖啡?；剖?、秦皮乙素和菊苣酸的含量。
　　方法：將小鼠隨機分成3組，分別為正常組、正常模型組和給藥模型組，給藥組給25g/kg生藥材劑量二丁顆粒提取物，正常組給予等量

2、的生理鹽水，連續(xù)給藥5天。最后一天給藥前1h模型組均腹腔注射氧嗪酸鉀鹽，給藥1h后從小鼠眼眶后靜脈叢進行采血測血漿中尿酸水平；采用Welch C18色譜柱（100mm×2.1mm,1.7μm），以0.1％甲酸水（A）-乙腈（B）為流動相梯度洗脫,體積流量為0.35mL/min,質(zhì)譜采用電噴霧（ESI）離子源，在正負離子模式下采集二丁顆粒藥材和給藥血漿；采用COSMOSIL C18色譜柱（4.6mm×250mm,5μm），乙腈-0.1%磷

3、酸為流動相，梯度洗脫，體積流量1mL/min，柱溫30℃，檢測波長為336nm測定3中活性成分含量。
　　結(jié)果：正常組、模型組和給藥組分別為175.94±30.13μmol/L、271.10±42.01μmol/L和211.94±26.57μmol/L。模型組高于正常組，給藥模型組低于正常模型組；通過二級高分辨質(zhì)譜分析結(jié)合對照品數(shù)據(jù)及相關(guān)文獻，共鑒定225個化合物的結(jié)構(gòu)，其主要化學成分為香豆素及其衍生物、黃酮及其苷類、生物堿、有機

4、酸、倍半萜類、木質(zhì)素類等。其中大鼠灌胃二丁顆粒后血中共發(fā)現(xiàn)12個入血成分，其中7個二丁顆粒中原形成分，5個為原形藥物的代謝產(chǎn)物；單咖啡?；剖?、秦皮乙素和菊苣酸標準曲線分別在0.0020～0.0406μg（r=0.9999）、0.0307～0.6130μg(r=0.9999)和0.0028～0.0563μg(r=0.9999)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好；平均加樣回收率分別為100.2%、99.7%、100.4%，RSD分別為1.7%、0.88