miR-155在2型糖尿病患者外周血的表達及其與血管并發(fā)癥的關系研究.pdf

1、血管并發(fā)癥是糖尿病患者致殘、致死的主要原因，其發(fā)生機制是復雜多樣的，其中＂炎癥學說＂得到了廣泛的認可，各類炎癥因子對糖尿病并發(fā)癥的作用得到了進一步的證實。細胞核因子-kB（Nuclear factor kappa B，NF-kB）、可溶性細胞間粘附分子-1（Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1，sICAM-1）均為重要的炎癥因子。而最新研究表明，微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)

2、作為調控細胞功能的關鍵因子，調節(jié)促炎因子及抑炎因子的表達，參與炎癥的發(fā)生發(fā)展過程，并起關鍵調控作用。miRNAs是一組長度約22nt的內源性非編碼單鏈RNA（ncRNA），其可通過結合靶基因3’端非翻譯區(qū)，降解靶 mRNA或者阻制靶mRNA的翻譯。miR-155作為一個具有炎性作用多種功能的miRNA分子，在低度炎癥性疾病中扮演著重要角色。但miR-155在2型糖尿病(T2DM)患者外周血的表達和對于T2DM慢性血管病變發(fā)病機制的參與及

3、調控作用的研究還很少。
　　目的：本研究通過檢測T2DM患者外周血miR-155、NF-kB、sICAM-1mRNA的表達，分析其變化情況，探討miR-155與NF-kB、sICAM-1的關系，和在T2DM慢性血管病變發(fā)生發(fā)展中可能的作用及機制，為研究 T2DM血管并發(fā)癥找到新的切入點，為臨床尋找新的治療手段提供理論依據(jù)。
　　方法：選取T2DM(根據(jù)WHO1999年診斷和分型標準)患者65例，男35例、女30例，年齡61.

4、79±10.55歲，病程11.73±7.93年，HbA1c(12.50±8.09)％。根據(jù)HbA1c水平將其分為：HbA1c<7%組、7%≤HbA1c<9%組、HbA1c≥9%組；按糖尿病病程分為病程<10年組、10年≤病程<20年組、病程≥20年組；按照T2DM慢性血管并發(fā)癥有無及類型分組：單純T2DM無血管病變組(A組)、血管并發(fā)癥組(B組)， B組再進一步分為微血管病變組（B1組）、大血管病變組（B2組）、同時有微血管病變和大血管

5、病變組（B3組）;將T2DM血管病變患者依據(jù)24h尿微量白蛋白定量分組：<30mg/24h為尿白蛋白正常組、30-300mg/24h為微量白蛋白尿組、≥300mg/24h為大量白蛋白尿組。所有患者均無糖尿病急性并發(fā)癥，無感染、腫瘤、原發(fā)肝臟疾病和非糖尿病性腎臟疾病等。選擇年齡、體重指數(shù)（BMI）相匹配的健康人30例作為對照組，男14例、女16例，血糖、血脂、血壓均正常。測定所有研究對象血壓、身高、體重，計算 BMI，并空腹8小時后晨起取

6、肘靜脈血，測定空腹血糖(FG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、谷丙轉氨酶(ALT)、總膽紅素(TBIL)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、血尿酸（UA）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）；采用Realtime RT-PCR法檢測外周血miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA的表達量；T2DM血管病變患者留24h尿標本測定微量白蛋白(24h-mAlb)水平。
　　結果:1.T2DM組miR-15

7、5、NF-κB、sICAM-1mRNA的表達均顯著高于對照組(P均<0.05）。HbA1c≥9%組和病程≥20年組miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA的表達均顯著高于HbA1c<7%組和病程<10年組（P均<0.05）；miR-155在7%≤HbA1c<9%組也明顯高于HbA1c<7%組（P<0.05），sICAM-1在HbA1c≥9%組或10年≤病程<20年組也顯著高于7%≤HbA1c<9%組或病程<10年組（P均<0.

8、05）。
　　2. T2DM血管病變組(B組)miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA的表達顯著高于單純T2DM無血管病變組(A組)(P均<0.05)。B3組miR-155的表達較B2組和A組均顯著升高（P均<0.05），B1組、B2組較A組也有升高，但差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)；B1組、B2組、B3組NF-κBmRNA表達均顯著高于A組，且B3組也明顯高于B1組和B2組（P均<0.05）；B1組、B3組sICA

9、M-1mRNA的表達顯著高于A組（P均<0.05）。微量白蛋白尿組和大量白蛋白尿組miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA表達均明顯高于尿白蛋白正常組，且大量白蛋白尿組miR-155、sICAM-1mRNA的表達也顯著高于微量白蛋白尿組（P均<0.05）。
　　3.多元相關分析顯示：miR-155與HbA1c、TG、NF-κB、sICAM-1明顯相關（P均<0.05）；多元逐步回歸分析顯示：miR-155與 NF-κB、

10、 sICAM-1呈正相關（P均<0.05）。
　　結論：T2DM患者miR-155表達增高,并隨病程延長、HbA1c水平升高而表達明顯增多。miR-155、NF-κB、sICAM-1的表達在血管病變組明顯高于無血管病變組，在微血管病變并大血管病變組或大量白蛋白尿組，其升高更顯著；多元逐步回歸分析示 miR-155與 NF-κB、sICAM-1明顯相關，均提示 miR-155可能參與了糖尿病血管病變的發(fā)生發(fā)展，miR-155與NF-