miR-155在2型糖尿病患者外周血的表達(dá)及其與血管并發(fā)癥的關(guān)系研究.pdf

1、血管并發(fā)癥是糖尿病患者致殘、致死的主要原因，其發(fā)生機(jī)制是復(fù)雜多樣的，其中＂炎癥學(xué)說(shuō)＂得到了廣泛的認(rèn)可，各類炎癥因子對(duì)糖尿病并發(fā)癥的作用得到了進(jìn)一步的證實(shí)。細(xì)胞核因子-kB（Nuclear factor kappa B，NF-kB）、可溶性細(xì)胞間粘附分子-1（Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1，sICAM-1）均為重要的炎癥因子。而最新研究表明，微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)

2、作為調(diào)控細(xì)胞功能的關(guān)鍵因子，調(diào)節(jié)促炎因子及抑炎因子的表達(dá)，參與炎癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，并起關(guān)鍵調(diào)控作用。miRNAs是一組長(zhǎng)度約22nt的內(nèi)源性非編碼單鏈RNA（ncRNA），其可通過(guò)結(jié)合靶基因3’端非翻譯區(qū)，降解靶 mRNA或者阻制靶mRNA的翻譯。miR-155作為一個(gè)具有炎性作用多種功能的miRNA分子，在低度炎癥性疾病中扮演著重要角色。但miR-155在2型糖尿病(T2DM)患者外周血的表達(dá)和對(duì)于T2DM慢性血管病變發(fā)病機(jī)制的參與及

3、調(diào)控作用的研究還很少。
　　目的：本研究通過(guò)檢測(cè)T2DM患者外周血miR-155、NF-kB、sICAM-1mRNA的表達(dá)，分析其變化情況，探討miR-155與NF-kB、sICAM-1的關(guān)系，和在T2DM慢性血管病變發(fā)生發(fā)展中可能的作用及機(jī)制，為研究 T2DM血管并發(fā)癥找到新的切入點(diǎn)，為臨床尋找新的治療手段提供理論依據(jù)。
　　方法：選取T2DM(根據(jù)WHO1999年診斷和分型標(biāo)準(zhǔn))患者65例，男35例、女30例，年齡61.

4、79±10.55歲，病程11.73±7.93年，HbA1c(12.50±8.09)％。根據(jù)HbA1c水平將其分為：HbA1c<7%組、7%≤HbA1c<9%組、HbA1c≥9%組；按糖尿病病程分為病程<10年組、10年≤病程<20年組、病程≥20年組；按照T2DM慢性血管并發(fā)癥有無(wú)及類型分組：?jiǎn)渭僒2DM無(wú)血管病變組(A組)、血管并發(fā)癥組(B組)， B組再進(jìn)一步分為微血管病變組（B1組）、大血管病變組（B2組）、同時(shí)有微血管病變和大血管

5、病變組（B3組）;將T2DM血管病變患者依據(jù)24h尿微量白蛋白定量分組：<30mg/24h為尿白蛋白正常組、30-300mg/24h為微量白蛋白尿組、≥300mg/24h為大量白蛋白尿組。所有患者均無(wú)糖尿病急性并發(fā)癥，無(wú)感染、腫瘤、原發(fā)肝臟疾病和非糖尿病性腎臟疾病等。選擇年齡、體重指數(shù)（BMI）相匹配的健康人30例作為對(duì)照組，男14例、女16例，血糖、血脂、血壓均正常。測(cè)定所有研究對(duì)象血壓、身高、體重，計(jì)算 BMI，并空腹8小時(shí)后晨起取

6、肘靜脈血，測(cè)定空腹血糖(FG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總膽紅素(TBIL)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、血尿酸（UA）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）；采用Realtime RT-PCR法檢測(cè)外周血miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA的表達(dá)量；T2DM血管病變患者留24h尿標(biāo)本測(cè)定微量白蛋白(24h-mAlb)水平。
　　結(jié)果:1.T2DM組miR-15

7、5、NF-κB、sICAM-1mRNA的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組(P均<0.05）。HbA1c≥9%組和病程≥20年組miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA的表達(dá)均顯著高于HbA1c<7%組和病程<10年組（P均<0.05）；miR-155在7%≤HbA1c<9%組也明顯高于HbA1c<7%組（P<0.05），sICAM-1在HbA1c≥9%組或10年≤病程<20年組也顯著高于7%≤HbA1c<9%組或病程<10年組（P均<0.

8、05）。
　　2. T2DM血管病變組(B組)miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA的表達(dá)顯著高于單純T2DM無(wú)血管病變組(A組)(P均<0.05)。B3組miR-155的表達(dá)較B2組和A組均顯著升高（P均<0.05），B1組、B2組較A組也有升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；B1組、B2組、B3組NF-κBmRNA表達(dá)均顯著高于A組，且B3組也明顯高于B1組和B2組（P均<0.05）；B1組、B3組sICA

9、M-1mRNA的表達(dá)顯著高于A組（P均<0.05）。微量白蛋白尿組和大量白蛋白尿組miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA表達(dá)均明顯高于尿白蛋白正常組，且大量白蛋白尿組miR-155、sICAM-1mRNA的表達(dá)也顯著高于微量白蛋白尿組（P均<0.05）。
　　3.多元相關(guān)分析顯示：miR-155與HbA1c、TG、NF-κB、sICAM-1明顯相關(guān)（P均<0.05）；多元逐步回歸分析顯示：miR-155與 NF-κB、

10、 sICAM-1呈正相關(guān)（P均<0.05）。
　　結(jié)論：T2DM患者miR-155表達(dá)增高,并隨病程延長(zhǎng)、HbA1c水平升高而表達(dá)明顯增多。miR-155、NF-κB、sICAM-1的表達(dá)在血管病變組明顯高于無(wú)血管病變組，在微血管病變并大血管病變組或大量白蛋白尿組，其升高更顯著；多元逐步回歸分析示 miR-155與 NF-κB、sICAM-1明顯相關(guān)，均提示 miR-155可能參與了糖尿病血管病變的發(fā)生發(fā)展，miR-155與NF-