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文檔簡介
1、目的:采用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)中的相對和絕對定量同位素標(biāo)記(isobaric Tags forRelative and Absolute Quantitation,iTRAQ)技術(shù)研究分析典型腎陽虛證患者接受右歸丸治療一月前后比較的血清差異表達(dá)蛋白,并對篩選到的差異表達(dá)蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)分析,闡釋右歸丸治療腎陽虛證的療效機(jī)制。
方法:根據(jù)中醫(yī)內(nèi)科學(xué)權(quán)威診療專家診斷及腎陽虛證評定量表判定,選取典型腎陽虛證患者4名給予右歸丸常規(guī)劑量口服
2、治療一個月,并于治療前后分別采集患者外周血,樣品處理后取血清進(jìn)行高豐度蛋白去除并提取蛋白,然后進(jìn)行蛋白質(zhì)的變性還原,并于蛋白質(zhì)徹底裂解成肽段后進(jìn)行iTRAQ標(biāo)記和Q-Exactive質(zhì)譜儀鑒定,質(zhì)譜分析原始數(shù)據(jù)用軟件Mascot2.2和Proteome Discovererl.4(thermo)進(jìn)行查庫鑒定及定量分析,篩選并鑒定出差異表達(dá)蛋白,并對差異表達(dá)蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)分析。
結(jié)果:此次試驗(yàn)最終共鑒定出血清蛋白數(shù)236種,
3、其中達(dá)到定量信息的為171種。4例患者治療后與治療前相比較均有差異表達(dá)蛋白,4例患者中均表達(dá)差異且表達(dá)方向一致的蛋白有6種,上調(diào)者占4種,下調(diào)者2種。經(jīng)查庫鑒定發(fā)現(xiàn)這6種差異表達(dá)蛋白共參與22種生物學(xué)過程和1條KEGG通路(Kyoto Encyclopedia of Genes andGenomes,京都基因與基因組百科全書),對這些差異表達(dá)蛋白進(jìn)行GO及KEGG通路注釋分析。
結(jié)論:補(bǔ)體C3(Complement C3,C3
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