脂聯(lián)素對膿毒癥大鼠肝功能障礙的保護作用.pdf

1、目的：采用盲腸結扎穿孔法（CLP）制備大鼠膿毒癥模型，然后給予外源性重組脂聯(lián)素對模型大鼠進行干預，動態(tài)觀察脂聯(lián)素對膿毒癥大鼠干預后不同手術時間點血清降鈣素原(PCT)、肝功能標記物（ALT、AST、TBIL）及肝組織中炎癥因子（TNF-α、IL-6）變化的影響，并對接受干預后的模型大鼠肝臟病理變化和形態(tài)變化進行記錄分析，探討脂聯(lián)素干預對膿毒癥大鼠肝功能障礙的保護作用，并進一步闡述其可能作用機制。
　　方法：通過隨機數(shù)字表法將清潔健

2、康Wistar待實驗大鼠54只，雌雄不拘，隨機分為假手術組（Sham）、膿毒癥組（CLP）及脂聯(lián)素干預組（APN+CLP），每組18只，每個大組大鼠根據(jù)實驗觀察時間點再隨機分為（3h、6h、12h）3個亞組，每組各6只。Sham組大鼠無菌剖腹后，分離盲腸，翻動盲腸，原位回納后關腹，不對其行盲腸結扎及穿刺術，其余兩組大鼠采用盲腸結扎和穿刺術制備膿毒癥模型，APN+CLP組大鼠CLP模型成功建立后立即行腹腔注射脂聯(lián)素600ug/100g。C

3、LP模型建立完成后，分別于術后3h、6h、12h采集血標本，用于檢測血清降鈣素原（PCT）、肝功能標記物（ALT、AST、TBIL）及肝組織中炎癥因子TNF-α、IL-6水平。各觀察時間點采血后立即處死大鼠，無菌取出完整肝臟，經(jīng)蘇木精-伊紅（HE）染色后顯微鏡下觀察肝臟病理形態(tài)變化。實驗所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析，以均數(shù)±標準差（-x±s）表示，兩組之間采用t檢驗進行比較，兩組以上之間采用單因素方差分析（One-way

4、 ANOVA）進行比較，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義，反之則P>0.05。
　　結果：各組大鼠術后不同觀察時間點血清肝功能標記物（ALT、AST、TBIL）變化：CLP組和APN+CLP組各觀察時間點血清ALT、AST、TBIL濃度呈現(xiàn)逐漸升高趨勢，與Sham組相比，結果存在統(tǒng)計學差異（P<0.05），但APN+CLP組各觀察時間點血清肝功能標記物濃度較CLP組均明顯下降（P<0.05）；各組大鼠不同觀察時間點血清降鈣素原（P

5、CT）濃度變化：CLP組和APN+CLP組在術后3h血清PCT水平即有所升高，但與Sham組相比差異無顯著統(tǒng)計學意義（P>0.05），觀察至CLP術后6h才顯著高于Sham組（P<0.05），術后12h仍持續(xù)升高，但APN+CLP組術后6h、12h血清PCT濃度較CLP組均顯著降低（P<0.05）；各組大鼠肝組織炎癥因子（TNF-α、IL-6）水平變化：與Sham組相比，CLP組和APN+CLP組各觀察時間點肝組織炎癥因子水平均明顯升高

6、，結果存在統(tǒng)計學差異（P<0.05），但APN+CLP組各觀察時間點較CLP組均明顯降低（P<0.05），除Sham組外，其余兩組大鼠肝組織炎癥因子均在術后6h達高峰，術后12h稍回落。各組大鼠不同觀察時間點肝組織病理結構變化：3h組織變化：Sham組肝細胞排列整齊規(guī)律，肝細胞形態(tài)一致，多呈多邊形，胞核多分布于細胞中心，呈圓形，胞質均勻無雜質；CLP組尚可觀察到正常肝小葉結構，偶見細胞核固縮、溶解、破裂現(xiàn)象，個別細胞內可見到含鐵血黃素顆

7、粒沉積；APN+CLP組肝臟損傷較CLP組稍減輕，但不明顯；術后12h肝組織可見如下形態(tài)變化，Sham組肝臟病理形態(tài)與術后3h對比無明顯變化，CLP組肝臟病理結構出現(xiàn)了明顯異常改變，肝細胞大小不均，排列極不規(guī)律，部分細胞可見腫脹變性，甚至各別細胞出現(xiàn)壞死，可見多個細胞胞核固縮、溶解、破裂現(xiàn)象，甚至可見肝細胞再生現(xiàn)象，有的細胞胞核出現(xiàn)雙核變，APN+CLP組肝組織結構基本恢復正常，較CLP組比較病理改變顯著減輕，但仍可見不同程度的病變；術