斜紋夜蛾核型多角體病毒日本B株pif基因及C1株分子鑒定研究.pdf

1、蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文斜紋夜蛾核型多角體病毒日本B株pif基因及C1株分子鑒定研究姓名：胡貴玉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：朱江20090501斜紋夜蛾核型多角體病毒口本B 株p ／f 基因及C l 株分子鑒定研究 中文摘要在細(xì)胞內(nèi)從3h 持續(xù)到7 2 h 都有轉(zhuǎn)錄本的存在。3 、構(gòu)建了以增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因( e g ／' p ) 為標(biāo)記的、p i f - 2 失活的重組斜紋夜蛾核型多角體病毒。分別擴(kuò)增

2、出p i f - 2 讀碼框上下游的不同片段及礎(chǔ)啟動(dòng)子啟動(dòng)的e g O , ，將三個(gè)片段按順序克隆進(jìn)p U C l 9 載體，構(gòu)建了轉(zhuǎn)移載體p S p l t - A p ／f - 2 一餡勿。將p S p l t —A p ／f 2 一e e f p 與野生型S p l t M N P V D N A 共轉(zhuǎn)染S p l i 細(xì)胞，通過(guò)同源重組和有限稀釋法篩選，獲得了以p h ．e e f p 基因替代p i f - 2 的重組病毒S

3、p l t M N P V - A p ／f - 2 一e g f p ，為S p l t M N P V p ／f - 2 的功能研究打下了基礎(chǔ)。4 、首次從分子層次研究T S p l t M N P V - J P ．C 1 的D N A 構(gòu)成。將純化的C 1 株基因組酶切，利用半補(bǔ)齊法獲得了C 1 株的基因組文庫(kù)。從文庫(kù)中隨機(jī)抽取8 個(gè)克隆測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果與中國(guó)G 2 株和日本C 3 株進(jìn)行序列比對(duì)，結(jié)果證明，所有的測(cè)序結(jié)果與中國(guó)