骨質(zhì)疏松癥和良性家族性成年人肌陣攣癲癇的基因定位和鑒定.pdf

1、本文對(duì)具有復(fù)雜遺傳模式和常染色體顯性遺傳模式的兩種疾病一骨質(zhì)疏松癥和良性家族性成年人肌陣攣癲癇一進(jìn)行了基因定位與鑒定研究。 關(guān)于骨質(zhì)疏松癥，我們運(yùn)用遺傳流行病學(xué)研究策略和蛋白質(zhì)組學(xué)研究策略，從兩個(gè)不同的層面，在中國(guó)漢族女性人群中定位和鑒定骨質(zhì)疏松癥的基因。 1)首先，我們選用了RFLP標(biāo)記MspI和MS遺傳標(biāo)記(GT)n，采用QTDT程序同時(shí)檢測(cè)了COL1A2基因與中國(guó)人群骨密度和骨大小的關(guān)聯(lián)和連鎖。MspI位點(diǎn)和(

2、GT)n位點(diǎn)存在緊密的連鎖不平衡。檢測(cè)到以下家庭內(nèi)關(guān)聯(lián)：MspI與腰椎(p=0.013)、全髖(p=0.053)、大轉(zhuǎn)子(p=0.004)的骨密度，(GT)<,17>與腰椎(p=0.012)、股骨頸(p=0.032)、轉(zhuǎn)子(p=0.023)的骨密度；(GT)<,12>與腰椎(p=0.009)的骨密度；M(GT)<,12>與腰椎(p=0.009)、髖部(p=0.017)、轉(zhuǎn)子(p=0.001)的骨密度；(GT)<,18>與髖部(p=0.0

3、53)、股骨頸(p=0.024)的骨密度；m(GT)<,18>與股骨頸(p=0.013)的骨密度。MspI與轉(zhuǎn)子間區(qū)(p=0.024)、全髖(p=0.043)的骨大小。除MspI與全髖(p>0.10)骨大小外，以上結(jié)果均得到排列檢測(cè)驗(yàn)證。這些結(jié)果表明COL1A2是影響中國(guó)女性骨密度和骨大小的QTL。 2)其次，運(yùn)用二元方差分析檢測(cè)了7對(duì)基因的14對(duì)相互作用對(duì)中國(guó)女性峰值骨密度的潛在影響。發(fā)現(xiàn)，ERP×IL6的相互作用對(duì)全髖部

4、(p=0.019)，轉(zhuǎn)子間(p=0.016)和股骨頸(p=0.019)的PBM顯著。AHSG×IL6對(duì)股骨頸PBM也有作用(p=0.046)。攜有GGPp的個(gè)體，全髖部，轉(zhuǎn)子間和股骨頸的BMD比GGpp的攜帶者平均要高18.0％，19.5％和14.8％。而GGSS攜帶者的BMD比GGSs攜帶者平均要高18.8％。 3)最重要的是，我們將蛋白質(zhì)組學(xué)研究策略應(yīng)用于復(fù)雜疾病骨質(zhì)疏松癥的研究。應(yīng)用通過(guò)雙相電泳和質(zhì)譜鑒定技術(shù)，首次對(duì)中

5、國(guó)女性高、低峰值骨密度個(gè)體的血液?jiǎn)魏思?xì)胞進(jìn)行了蛋白表達(dá)譜分析和比較，共鑒定了6個(gè)差異表達(dá)蛋白(色氨酸-天冬氨酸重復(fù)蛋白1，肌凝乳蛋白，alpha微管蛋白，ras抑制蛋白1，蛋白酶復(fù)合體亞單位5，脯氨酸4-羥化酶)，后面5個(gè)差異表達(dá)蛋白得到Western Blotting驗(yàn)證。蛋白酶復(fù)合體亞單位5，脯氨酸4-羥化酶對(duì)骨代謝的潛在作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究闡明。色氨酸-天冬氨酸重復(fù)蛋白1，肌凝乳蛋白，alpha微管蛋白，ras抑制蛋白1與破骨作

6、用有關(guān)，它們可能影響穿壁過(guò)程(通過(guò)調(diào)節(jié)單核細(xì)胞的黏附、變形和遷移)、影響單核細(xì)胞分化、影響骨吸收功能(調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞足細(xì)胞器的形成、黏附和運(yùn)動(dòng))，最終導(dǎo)致骨密度的變化。 關(guān)于良性家族性成年人肌陣攣癲癇，我們首次對(duì)中國(guó)一個(gè)BFAME大家系進(jìn)行了臨床診斷和遺傳分析。通過(guò)候選區(qū)域掃描排除了國(guó)際上報(bào)道的兩個(gè)基因組區(qū)域，通過(guò)全基因組掃描鑒定了一個(gè)新的基因組區(qū)域10p15，并最終將致病基因縮小到6 Mb的區(qū)間。遺傳學(xué)研究結(jié)果結(jié)合臨床特征初