丁酸鈉誘導TXNIP表達的調控機制研究及其對A549細胞遷移的影響.pdf

1、目的:
　　丁酸鈉（Sodium butyrate，NaB）是一種組蛋白去乙?；?HDACs)抑制劑，具有廣泛的生理功能包括調節(jié)細胞分化、增殖和腫瘤抑制功能。硫氧還蛋白相互作用蛋白（thioredoxin-interacting protein，TXNIP）結合并負調控硫氧還蛋白(TRX)活性進而調節(jié)細胞內的氧還水平，同時作為一個轉錄負調控因子，TXNIP與HDACs結合并調控多個下游基因的表達，參與細胞生長及代謝等重要功能。最

2、近研究表明TXNIP在腫瘤生長和轉移中發(fā)揮著重要作用。因此本課題以非小細胞肺癌細胞系A549為細胞模型，探索丁酸鈉處理后TXNIP表達、細胞內定位變化及TXNIP對A549細胞遷移的影響。
　　方法:
　　流式細胞儀分析以及DAPI染色分析NaB對A549細胞的影響?；虮磉_芯片(Affermtry)分析NaB處理前后其基因表達差異，發(fā)現丁酸鈉處理A549細胞后TXNIP表達上調，進一步qPCR和Western blot分別

3、驗證基因表達芯片結果，雙熒光素酶系統(tǒng)檢測NaB對TXNIP啟動子活性的影響。過表達帶有綠色熒光標簽的TXNIP質粒，并用熒光顯微鏡觀察TXNIP在細胞中的定位。構建A549細胞TXNIP knockdown穩(wěn)定細胞系，遷移實驗檢測TXNIP knockdown之后對細胞遷移的影響。
　　結果:
　　(1) NaB處理誘導A549細胞死亡;
　　(2) NaB上調TXNIP表達;
　　(3) NaB通過核轉錄因子N

4、F-YC(CCAAT)激活TXNIP轉錄;
　　(4) NaB不會改變全長或截短的TXNIP細胞內定位;
　　(5) TXNIP knockdown對A549細胞遷移沒有影響，在NaB處理下TXNIPknockdown后促進A549細胞遷移。
　　結論:
　　NaB通過核轉錄因子(Nulear Factor Y，NF-Y)激活TXNIP轉錄參與其誘導A549細胞死亡的過程。在NaB條件下TXNIP knockdo