馬傳染性貧血病Rev蛋白單克隆抗體的制備及表位鑒定.pdf

1、馬傳染性貧血病毒(EIAV)是反轉錄病毒科慢病毒屬成員之一，可引起嚴重的馬屬動物傳染病-馬傳染性貧血病(EIA)。慢病毒可不斷變異逃脫宿主免疫監(jiān)視，該特性是慢病毒疫苗很難研制成功的重要因素，而EIAV作為首個研制出疫苗并成功應用的的病毒，被認為是研究慢病毒感染免疫機制的重要模型。Rev蛋白作為EIAV的輔助蛋白之一，主要承擔在病毒復制晚期向核外轉運未完成剪切的mRNA的作用，以促進病毒的組裝。所以，Rev在EIAV細胞內復制中起著重要作

2、用。最新研究顯示，在疾病感染的不同臨床階段Rev會產生變異形成不同的亞型，因此，對其結構和功能研究將對研制針對慢病毒的疫苗和藥物提供重要的基礎研究數(shù)據(jù)。
　　單抗是用于對蛋白功能進行研究的重要工具。為此，本研究通過PCR獲得Rev目的基因，通過雙酶切將其克隆到pET30a原核表達載體上，通過原核表達和蛋白純化，獲得純度高并具有免疫原性的Rev蛋白。用Rev蛋白免疫8周齡的BALB/c小鼠，通過細胞融合技術獲得了一株分泌針對Rev抗