DADS抑制SRC、ERK通路下調DJ-1對淋巴瘤細胞增殖侵襲的影響.pdf

1、目的:檢測DJ-1蛋白在惡性淋巴瘤，淋巴結反應性增生及正常淋巴結組織中的表達，研究二烯丙基二硫（DADS）對彌漫大B細胞淋巴瘤細胞系OCI-LY1和Burkitt淋巴瘤細胞系Raji生物學行為，DJ-1表達及SRC，ERK信號通路的影響，為淋巴瘤的治療提供新的思路。
　　方法:利用組織芯片結合免疫組化檢測不同類型淋巴瘤，淋巴結反應性增生和正常淋巴結組織中DJ-1蛋白表達變化；用CCK-8法、流式細胞術、Giemsa染色法、Tran

2、swell遷移侵襲小室實驗分別檢測DADS對OCI-LY1細胞和Raji細胞增殖、細胞周期、分化及遷移侵襲能力等生物學行為的影響。Western blot法檢測DADS處理后淋巴瘤OCI-LY1細胞和Raji細胞中DJ-1蛋白的表達，及Src，Erk信號通路的變化，聯(lián)合Src抑制劑、Erk抑制劑對淋巴瘤OCI-LY1細胞和Raji細胞中DJ-1蛋白表達的影響。
　　結果:組織芯片結合免疫組化結果顯示：霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤(

3、包括彌漫性大B)細胞核DJ-1高表達率分別為42.9％、72.1%，高于非腫瘤組織（淋巴結反應性增生和正常淋巴結）14.3%（P<0.05），細胞漿高表達率分別為100%、93.4%，高于非腫瘤組織（淋巴結反應性增生和正常淋巴結）28.6%（P<0.05）。CCK-8法結果顯示：OCI-LY1細胞經不同濃度（5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L）DADS作用24h、48h、72h后，增殖抑制作用呈時間-濃度

4、依賴性增長。在Raji細胞中，經不同濃度（2.5mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L）DADS作用24h、48h、72h后，同樣呈時間-濃度依賴性抑制細胞增殖。流式細胞術檢測顯示：OCI-LY1細胞和Raji細胞經DADS作用后，G1期百分率分別由47.72%、30.90%上升至54.43%、51.89%（P<0.05），出現(xiàn)G1期阻滯。吉姆薩染色顯示，DADS能誘導Raji細胞和OCI-LY1細胞向正常淋巴細

5、胞方向分化。Western blot結果顯示：DADS處理OCI-LY1細胞和Raji細胞12h、24h、48h后，DJ-1蛋白表達水平表現(xiàn)為時間依賴性的下降（P<0.05）。經DADS處理OCI-LY1細胞和Raji細胞5min、15min、30min、60min后，p-Src、p-Erk的蛋白表達水平較未處理的各組均下降（P<0.05），且呈時間依賴性，Src、Erk總蛋白表達水平沒有顯著變化。Src抑制劑、Erk抑制劑以及二者分別

6、聯(lián)合DADS處理OCI-LY1細胞和Raji細胞12h、24h、48h后，DJ-1蛋白水平同樣表現(xiàn)為時間依賴性的下降（P<0.05），且聯(lián)合處理組與Src抑制劑、Erk抑制劑單獨處理組相比DJ-1蛋白水平下調更加明顯。遷移侵襲實驗顯示：Src抑制劑、Erk抑制劑作能協(xié)同DADS抑制Raji細胞和OCI-LY1細胞的遷移和侵襲。
　　結論:
　　1.DJ-1在多種類型淋巴瘤細胞核與細胞漿中均高表達。
　　2.DADS可抑