小麥粒重形成相關基因ATP-β和AGP-S的克隆與表達特征分析.pdf

1、ZhejiangA&FUniversityDissertationfortheDegreeofMasterCloningandexpressionofATPpandAGPSrelatedtowheatkernelweightCandidate：WeiWeiAdviser：、№iZhouSpecialty：SeedDateofSubmission：December21，2015ZhejiangA&FUniversityLin’an，zhe

2、jiangprovince，PRChinaDecember2015摘要摘要小麥(Triticumaestivum)是重要的糧食作物之一。粒重是小麥產量的重要衡量指標。本研究通過對普通小麥中國春(ChinaSpring，CS)野生二粒小麥(Triticumdicoccoides，TDIC)染色體臂置換系(CASLs)進行考種分析，篩選得到大粒重、小粒重置換系CASL7AL和CASL6BS。對CS、CASL7AL和CASL6BS發(fā)育15d的

3、籽粒進行轉錄組測序挖掘他們之間差異表達的基因，并對其功能進行注釋，預測參與粒重形成的候選基因，分析他們的染色體定位信息和表達特征，主要研究結果如下：1為了對控制小麥粒重的QTLs位點進行分析，對CASLs及其親本CS、TDIC的籽粒性狀進行考種研究發(fā)現(xiàn)，CASL7AL粒長、粒寬及千粒重顯著高于親本CS，而CASL6BS的粒長、粒寬及千粒重顯著小于受體親本CS，推測7AL和6BS染色體臂上可能存在著控制小麥粒重的QTLs位點。2提取CAS

4、L7AL、CASL6BS及CS開花15d后籽?？俁NA進行轉錄組測序，得到15G數(shù)據(jù)量，對差異表達基因進行比較分析發(fā)現(xiàn)，CASL6BSVSCS、CASL6BSVS7AL以及CASL7ALVSCS分別有2005、2134和778個差異表達基因；并對所有差異表達基因進行了模式聚類、功能注釋以及富集分析。通過分析我們篩選得到兩個粒重形成候選基因ATPfl和AGPS。3利用同源克隆技術克隆小麥ATPfl基因，此基因定位于小麥7AL染色體臂。利用

5、RTPCR技術對該基因的時空表達特征進行分析，結果表明該基因在小麥葉片和穗柄中的表達量較高；在小麥籽粒發(fā)育過程中，ATPfl基因的表達量呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢。利用基因槍轉化洋蔥表皮對該基因進行亞細胞定位表明，此基因主要在細胞質中表達。4利用同源克隆技術克隆了AGPS基因，此基因定位于小麥7AL染色體臂；通過生物信息學分析發(fā)現(xiàn)，其與其他物種的AGP大、小亞基有較高的同源性。利用RTqPCR對其進行表達特征分析，發(fā)現(xiàn)AGPS基因均在籽粒中