麒麟菜中類菌孢素氨基酸(MAAs)的提取、純化、鑒定及抗氧化活性研究.pdf

1、類菌孢素氨基酸(MAAs)廣泛分布于海洋生物中,特別在海藻中含量最多, MAAs由于具有較強的紫外吸收特性,是天然的高效紫外線吸收劑。目前很多學(xué)者已經(jīng)在多種生物中發(fā)現(xiàn)了MAAs的存在,并且就MAAs在藻體中的分布、光照對于MAAs合成的誘導(dǎo)作用機制進行了研究,但是目前關(guān)于麒麟菜中MAAs的研究報道還比較少,而且關(guān)于MAAs活性及應(yīng)用方面的研究很少。我國海藻麒麟菜資源豐富,但目前的利用率很低,提高海藻的利用率成為未來研究的趨勢?；谝陨显?/p>

2、因,本文以海南產(chǎn)麒麟菜為原料,利用紫外光譜、液相色譜、液質(zhì)聯(lián)用等技術(shù)手段對麒麟菜中的MAAs進行鑒定,確定了MAAs的種類;采用水浴提取和超聲波輔助提取兩種方法優(yōu)化了MAAs的提取工藝;通過幾種樹脂對MAAs純化效果的比較,從而確定了最佳的純化工藝條件;利用體外抗氧化實驗驗證了MAAs的抗氧化能力。本文取得的研究成果如下:
　　(1)本文通過紫外光譜掃描、液相色譜、液質(zhì)聯(lián)用等技術(shù)手段,對麒麟菜中主要的MAAs成分進行了分析鑒定,鑒

3、定出了麒麟菜中含有八種MAAs,根據(jù)最大吸收波長和液質(zhì)聯(lián)用結(jié)果,判斷這八種MAAs分別為:Mycosporine-Gly、Palythine、Mycosporine-NMA:Ser、Mycosporine-2Gly、Shinorine、Usujirene、Porphyra-334、E-Palythenic Acid,其中Usujirene和Shinorine的含量最多,占到MAAs總量的95％以上。
　　(2)以麒麟菜中含量最高的

4、Usujirene為指標(biāo),建立了MAAs的兩種測定方法,即紫外光譜測定法(UV法)和液相色譜法(HPLC法),通過驗證發(fā)現(xiàn)UV法的測定結(jié)果偏高,因此在要求精確度較高的情況下應(yīng)采用HPLC法。同時也可以使用經(jīng)過擬合方程y=1.04727x2+(2.33413E-4)x+15.74627矯正的UV法。
　　(3)通過正交優(yōu)化實驗,確定了水浴浸提法中影響麒麟菜中MAAs提取率的因素主次順序為:液固比>提取溫度>甲醇濃度>提取時間。MAA

5、s的最佳工藝組合為:液固比60(mL/g)、提取溫度40℃、甲醇濃度30%、提取時間2 h。針對傳統(tǒng)水浴提取方法中的溶劑用量大、處理時間長等不足,引進了超聲波輔助提取方法。通過實驗確定了超聲波輔助提取法中影響提取率的主要因素和最佳提取條件,降低了液固比和有機溶劑甲醇的用量,提高了提取率。因此,MAAs的超聲波輔助提取的最佳工藝組合為:超聲處理時間20 min、甲醇濃度10%、液固比30。在最優(yōu)條件下超聲波輔助提取法的提取率為5.52 m

6、g/g,與水浴提取法比較MAAs的提取率提高了0.51 mg/g。
　　(4)通過靜態(tài)實驗,篩選出了具有最大吸附率和解析率的001×7型離子交換樹脂,并對影響001×7靜態(tài)吸附率和解析率的幾個因素進行了考察,確定了001×7樹脂的最佳純化條件為:上柱液濃度為5 mg/mL,上柱液的pH為6,吸附時間80 min,解析液的最佳濃度是3%的氨水溶液。通過動態(tài)實驗確定了柱高比為1:8的001×7層析柱的最優(yōu)上柱條件為:上柱流速2 BV/