基于不同工作模式超聲預(yù)處理的麥胚酶解及其產(chǎn)物活性和穩(wěn)定性的研究.pdf

1、小麥胚芽是小麥面粉加工中的副產(chǎn)物，其富含蛋白質(zhì)，是制備ACE抑制肽的優(yōu)質(zhì)原料。本課題組前期大量研究發(fā)現(xiàn)，麥胚的超聲波預(yù)處理對(duì)其酶解產(chǎn)物ACE抑制活性的提高具有顯著的效果。為了獲取更好超聲波預(yù)處理效果，本文首先從超聲波工作模式的優(yōu)化入手，研究不同工作模式超聲預(yù)處理對(duì)麥胚水解度和酶解產(chǎn)物ACE抑制率的影響，進(jìn)而優(yōu)化超聲預(yù)處理和酶解反應(yīng)參數(shù)，并通過(guò)紫外光譜、巰基與二硫鍵含量的變化研究超聲波預(yù)處理對(duì)麥胚蛋白結(jié)構(gòu)的影響，探討結(jié)構(gòu)變化與酶解產(chǎn)物AC

2、E抑制活性之間的關(guān)系；最后對(duì)制備得到的麥胚酶解產(chǎn)物進(jìn)行體外穩(wěn)定性試驗(yàn)。
　　主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)論如下：
　　（1）為了研究不同工作模式超聲預(yù)處理對(duì)脫脂小麥胚芽水解度和酶解物ACE抑制率的影響，在相同能耗條件下（單位體積超聲功率40W/L)，利用聚能逆流單頻、聚能逆流雙頻、脈沖掃頻多頻、發(fā)散三頻、對(duì)振雙頻等五種工作模式超聲對(duì)脫脂小麥胚芽進(jìn)行預(yù)處理。結(jié)果表明，超聲波預(yù)處理對(duì)麥胚水解度沒(méi)有顯著的影響，但可以顯著提高酶解產(chǎn)物的ACE抑

3、制活性；相同功率消耗下不同的超聲波工作模式對(duì)酶解效果的影響有顯著的差異， ACE抑制率提高率最大值8.76％是最小值3%的2.92倍；最佳的超聲波工作模式為脈沖平板式40 kHz/28 kHz雙頻超聲。
　　（2）采用最優(yōu)的超聲波工作模式，以水解度和ACE抑制率為指標(biāo)，通過(guò)單因素逐級(jí)優(yōu)化法，對(duì)超聲波預(yù)處理脫脂小麥胚芽及脫脂小麥胚芽的酶解工藝進(jìn)行了優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果表明，超聲預(yù)處理與酶解的最佳工藝條件為：?jiǎn)挝惑w積超聲功率60 W/L、超

4、聲初始溫度60℃、超聲處理時(shí)間70 min、酶解pH9、底物濃度7%、酶解加酶量1.0%、酶解時(shí)間90 min。在該條件下，酶解產(chǎn)物IC50值為2.483 mg/mL，和未超聲對(duì)照組相比，IC50值降低了5.8％，另外水解液中總氨基酸和疏水性氨基酸含量有所提高。
　　（3）對(duì)超聲過(guò)程中脫脂小麥胚芽的紫外吸收光譜、巰基與二硫鍵含量進(jìn)行了檢測(cè)。通過(guò)對(duì)比分析在不同單位體積超聲功率、超聲時(shí)間、超聲初始溫度、底物濃度下，紫外吸收光譜、巰基與

5、二硫鍵含量變化情況與其對(duì)應(yīng)的ACE抑制率變化情況，認(rèn)為紫外吸收光譜的變化與超聲波作用使得酶解物ACE抑制率升高有關(guān)，巰基與二硫鍵含量的變化說(shuō)明超聲使得麥胚蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，但不能完全說(shuō)明其變化與酶解物ACE抑制率變化相關(guān)。
　?。?）對(duì)麥胚酶解產(chǎn)物中多糖成分的活性進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)其具有降血壓和抗氧化的作用，同時(shí)也證明麥胚酶解產(chǎn)物兼具抗氧化的作用。從麥胚酶解產(chǎn)物的體外穩(wěn)定性試驗(yàn)可知，麥胚酶解產(chǎn)物的降血壓活性和抗氧化活性對(duì)熱、酸及腸