不同保存期紅細胞對心臟手術(shù)患者負性作用及其相關(guān)機制研究.pdf

1、目的：
　　本研究通過回顧性病例分析探尋陳舊紅細胞輸注對體外循環(huán)冠脈搭橋患者術(shù)后結(jié)局的影響,并在此基礎(chǔ)上,分別從細胞水平、亞細胞水平和代謝組學(xué)角度探索不同保存期懸浮紅細胞上清對心肌細胞的作用及其發(fā)生機制,為進一步明確陳舊紅細胞功能變化、規(guī)避陳舊紅細胞輸注導(dǎo)致的不良后果、提高臨床紅細胞治療效果提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　1.將住院期間術(shù)后常見嚴(yán)重并發(fā)癥作為主要觀察指標(biāo)并定義為“惡性結(jié)局”,按“惡性結(jié)局”發(fā)生與否將22

2、1名體外循環(huán)冠脈搭橋患者分為實驗組和對照組,巢式病例對照研究方法將樣本按照性別、年齡和體外循環(huán)時間以1:3比例匹配,條件 logistic回歸方法分析紅細胞保存時間是否是影響體外循環(huán)冠脈搭橋患者預(yù)后的主要因素。
　　2.采集6人份18-20歲男性合格獻血員血液標(biāo)本2U,制成懸浮紅細胞,分別在庫存0、7、14、21、28和35d時離心留取上清,將不同保存期懸浮紅細胞上清按大劑量輸血比例(10U)與SD乳鼠心肌細胞共培養(yǎng),分別在作用0

3、.5h、3h、6h和24h觀察心肌細胞搏動性。
　　3.模擬陳舊懸浮紅細胞上清中鉀離子濃度并探討其對心肌細胞搏動性影響;不同保存期懸浮紅細胞上清與心肌細胞作用24h時,檢測心肌細胞胞內(nèi)活性氧水平,并對其進行細胞骨架和線粒體膜電位染色;核磁共振技術(shù)檢測不同保存期懸浮紅細胞上清的代謝組學(xué)改變。
　　結(jié)果：
　　1.平均紅細胞保存時間與“惡性結(jié)局”的發(fā)生有顯著相關(guān)性,平均紅細胞保存時間每增加一天,發(fā)生“惡性結(jié)局”的風(fēng)險就增加

4、1.2倍(95％CI:1.032-1.401, p=0.018)。
　　2.當(dāng)紅細胞上清與心肌細胞作用3h時,保存14天或更陳舊的紅細胞上清可導(dǎo)致部分心肌細胞停搏,其中14天組停搏率達27.8%,35天組44.4%;反應(yīng)時間延長到6h時,7天及以后的紅細胞上清均導(dǎo)致心肌細胞不同程度停止搏動,其差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001)。
　　3.模擬陳舊紅細胞鉀離子濃度并未造成心肌細胞停搏,陳舊懸浮紅細胞上清作用的心肌細胞其 RO

5、S表達、細胞骨架和線粒體膜電位變化較新鮮紅細胞組均未發(fā)現(xiàn)顯著差別。核磁共振代謝組學(xué)研究發(fā)現(xiàn),隨懸浮紅細胞保存時間的延長,樣本中纈氨酸/亮氨酸/異亮氨酸、乳酸和丙氨酸含量升高,而枸櫞酸和糖類含量顯著下降,且變化具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.陳舊紅細胞輸注可顯著影響體外循環(huán)冠脈搭橋患者短期預(yù)后,此類患者圍術(shù)期應(yīng)盡量輸注新鮮紅細胞。
　　2.保存期大于14天的懸浮紅細胞上清可不同程度導(dǎo)致體外SD大鼠心