鐵皮石斛多糖對高糖狀態(tài)下Min6細胞胰島素分泌及NF-κB-iNOS-NO信號通路影響的研究.pdf

1、目的：
　　觀察鐵皮石斛多糖(Polysaccharide of dendrobium candidum,PDC)對高糖環(huán)境下小鼠胰腺β細胞株Min6細胞胰島素分泌、一氧化氮(Nitrogen monoxidum, NO)產(chǎn)生和NF-κB(核因子)表達的影響，探討PDC降血糖和保護胰島β細胞的可能機制。
　　方法：
　　在高糖(35.0 mmol/L)環(huán)境下培養(yǎng)小鼠胰島β細胞瘤株Min6細胞48小時誘導損傷，同時用PD

2、C（100、200和400μg/mL）處理細胞48小時。實驗分為對照組(25mmol/l)、甘露醇組、高糖組（35mmol/l）、不同劑量PDC（100、200和400μg/mL）組和高糖（35mmol/l）+不同劑量PDC（100、200和400μg/mL）組。（1）采用MTT法和流式細胞術(shù)分別檢測各組細胞活力和細胞凋亡，并計算細胞凋亡率。（2）硝酸還原酶法檢測各組細胞培養(yǎng)液中NO的含量。（3）放射免疫法檢測各組細胞胰島素的分泌。（4

3、）應用Western blot檢測各組細胞中iNOS及NF-κB蛋白水平的表達。
　　結(jié)果：
　?。?）與對照組相比，高糖組Min6細胞活力降低（P<0.05），細胞凋亡率增加（P<0.05），培養(yǎng)液中胰島素水平明顯下降（P<0.05），NO值較其他組上升（P<0.05），Min6細胞中NF-κB蛋白表達及iNOS蛋白表達均增加（均P<0.05）。
　?。?）與對照組相比，PDC（100、200和400μg/mL）組，

4、細胞活力和細胞凋亡率沒有明顯變化（均P>0.05），培養(yǎng)液中胰島素水平及NO值未明顯增加（均P>0.05），培養(yǎng)液中 NF-κB蛋白表達和 iNOS的蛋白表達也未明顯增加（均P>0.05）。
　　（3）與高糖組相比，高糖+PDC（100、200和400μg/mL）組Min6細胞活力增加（P<0.05），細胞凋亡率降低（P<0.05），培養(yǎng)液中胰島素水平增加（P<0.05），培養(yǎng)液中NO的水平降低（P<0.05），細胞中NF-κB蛋