Akt-mTOR活化抗UVB誘導HaCaT細胞凋亡的研究.pdf

1、背景：皮膚中KC的凋亡異常與許多皮膚病如銀屑病、扁平苔蘚、濕疹、白癜風、皮膚老化和皮膚癌等密切相關。KC的凋亡易受環(huán)境因素的影響，其中中波紫外線(UVB)輻射尤為重要。UVB輻射易導致皮膚日曬傷，而慢性長期的輻射則可以導致皮膚光老化甚至皮膚癌的發(fā)生，這一過程中KC凋亡異常是其重要的病理生理基礎。近年研究發(fā)現UVB體內外都可激活KC的抗凋亡信號分子磷酸肌醇3激酶(PI3K)和Akt。UVB誘導KC凋亡過程中，胰島素樣生長因子-1受體(IG

2、F-1R)的活化可以保護UVB誘導的凋亡，并且IGF-1R缺失可加快UVB誘導的KC凋亡，證實UVB可以活化IGF-1R、促進抗凋亡的作用。上述研究證實UVB誘導KC凋亡的過程中存在KC的自身抗凋亡作用，但其具體機制仍未明確。
　　 目的：通過建立體外UVB照射HaCaT的模型，檢測Akt/mTOR通路中p-EGFR、p-Akt、p-S6、p-S6K、p-4EBP1的水平變化，并且檢測該通路活化對HaCaT凋亡的影響，旨在探明U

3、VB對Akt/mTOR通路的影響，以及該通路活化在KC抗凋亡中的作用。闡明UVB誘導KC凋亡和抗凋亡的分子機制，更加全面準確理解UVB對KC作用的機制，為闡明KC凋亡異常密切相關的皮膚病如白癜風、皮膚老化和皮膚癌的分子作用機理，并為這些疾病的預防和治療提供全新的思路和手段。
　　 方法：Western blotting測定Akt/mTOR通路信號分子的動態(tài)水平變化，免疫熒光Hoechst 33342染色檢測細胞凋亡率。
　

4、　 結果：
　　 1.UVB可以激活HaCaT細胞Akt/mTOR通路，并在一定范圍內（5mJ/cm2～30mJ/cm2）呈劑量依賴性，在一定范圍內（5min～30min）呈時間依賴性。
　　 2.EGFR抑制劑PD153035預處理顯著抑制了UVB誘導的p-EGFR(1068)水平增加，同時也顯著抑制了UVB誘導的p-Akt(Ser473、T308)、p-S6 (S235/236)水平增加。
　　 3.PI3

5、K抑制劑LY 294002預處理能顯著抑制UVB誘導的p-Akt(Ser473)水平增加，同時也能抑制UVB誘導的p-4EBP1(S65)、p-S6(S235/236)、p-S6K(S235/236)水平增加。
　　 4.雷帕霉素預處理對p-AKT(Ser473)的水平無影響(P>0.05)，但能顯著抑制UVB誘導的p-4EBP1(S65)、p-S6(S235/236)、p-S6K(S235/236)水平增加。
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