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1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文大腸癌相關(guān)抗原LEA的臨床病理診斷應(yīng)用研究姓名:馮慧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師:宋今丹2001.4.1度,間接免疫熒光法和間接ELISA法測(cè)定活性和特異性。免疫組織化學(xué)(S一P法)研究LEA和CEA在人體大腸腫瘤、病變及正常組織中的表達(dá)。免疫細(xì)胞化學(xué)和流式細(xì)胞儀觀察和分析LEA和CEA在大腸癌細(xì)胞系的表達(dá)。采用r檢驗(yàn)和方差分析,計(jì)算檢測(cè)的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、預(yù)斷值、似然比、可靠度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果腹水
2、效價(jià)為10一‘,純化后濃度為1.98m歲mlND一1的效價(jià)為10一‘,SDS一PAGE電泳在MW55000和MW2500()處顯示為均一的兩條帶,純度較好。間接ELISA和間接免疫熒光結(jié)果表明,與抗CEA單抗相比ND一1單抗對(duì)大腸痛細(xì)胞具有很強(qiáng)的特異性結(jié)合力(P0.01),免疫細(xì)胞化學(xué)染色表明LEA分布在大腸癌細(xì)胞系的細(xì)胞膜表面。FACS檢測(cè)LEA抗原在CCL一187CX一1,CloneA,和CCL一229細(xì)胞表達(dá)的陽(yáng)性峰平均熒光強(qiáng)度呈
3、遞減趨勢(shì),并且強(qiáng)于CEA的表達(dá)JR.LEA在高分化大腸癌細(xì)胞系高度表達(dá),并且低侵襲表達(dá)盤高于高俊襲細(xì)胞。LEA與CEA在大腸瘩組織內(nèi)的分布呈明顯的異質(zhì)性,痛組織分化程度越高,LEA表達(dá)的陽(yáng)性率及陽(yáng)性強(qiáng)度也越高,LEA對(duì)高分化腺癌表現(xiàn)出更高的選擇性。與CEA相比,LEA在非瘍組織中表達(dá)的陽(yáng)性率較低。LEA在腺瘤中表達(dá)的陽(yáng)性率,明顯高于廟旁粘膜和正常粘膜。LEA在正常粘膜、痛旁粘膜、大腸腺瘤、大腸痛組織中的陽(yáng)性表達(dá)呈遞增趨勢(shì),.LEA在正常
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