內(nèi)皮祖細(xì)胞攜帶KiSS-1基因?qū)Ρ茄拾┳饔玫膶?shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　(1)闡明KiSS-1基因在鼻咽癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。
　　(2)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染KiSS-1基因的EPCs在鼻咽癌防治中的應(yīng)用價(jià)值。
　　方法：
　　(1)構(gòu)建含KiSS-1重組質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染人臍靜脈血分離培養(yǎng)的血管內(nèi)皮祖細(xì)胞（Endothelial Progenitor Cells,EPCs），獲得高表達(dá) KiSS-1基因的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞（KiSS-1-EPCs）；
　　(2)構(gòu)建鼻咽癌荷瘤裸鼠模型并通過其尾靜

2、脈注入KiSS-1-EPCs；
　　(3)觀察KiSS-1-EPCs對(duì)腫瘤及其轉(zhuǎn)移灶的影響。
　　結(jié)果：通過密度梯度離心法和6％羥乙基淀粉沉降法成功從人臍血獲得內(nèi)皮祖細(xì)胞，并完成對(duì)其培養(yǎng)、傳代、擴(kuò)增和鑒定;完成將KiSS-1基因轉(zhuǎn)染進(jìn)人臍血內(nèi)皮祖細(xì)胞，并通過western blot的方法對(duì)轉(zhuǎn)染后的內(nèi)皮祖細(xì)胞進(jìn)行鑒定;建立了穩(wěn)定的鼻咽癌裸鼠肺轉(zhuǎn)移模型;將轉(zhuǎn)染過KiSS-1重組質(zhì)粒的EPCs（KiSS-1-EPCs）經(jīng)裸鼠尾靜脈

3、注入鼻咽癌裸鼠體內(nèi)，每只老鼠注入細(xì)胞的濃度為2×106/mL，并將其作為實(shí)驗(yàn)組;再將未轉(zhuǎn)染過KiSS-1重組質(zhì)粒的單純EPCs，以同等濃度經(jīng)裸鼠尾靜脈注入鼻咽癌裸鼠體內(nèi)，并將其作為對(duì)照組。結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組移植瘤的重量分別為1.385±0.207g，1.474±0.229g，兩組數(shù)據(jù)之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P>0.05）,兩組肺臟的轉(zhuǎn)移灶生成率分別是5%，30%，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P<0.05），肺臟的轉(zhuǎn)移灶數(shù)目分別是19.00，