BCSC-1基因?qū)Ρ茄拾┑囊职┳饔?pdf

1、本實驗室以往用反義技術(shù)抑制人鼻咽癌細胞CNE-2L2的α-甘露糖苷酶Man2cl基因表達，觀察到CNE-2L2細胞的惡性生物學(xué)行為，包括在培養(yǎng)中生長、成瘤性生長和轉(zhuǎn)移力等均明顯抑制。為探討其機制，本實驗室曾用基因芯片比較了野生型CNE-2L2細胞(W細胞)與Man2cl基因表達抑制的CNE-2L2細胞(AS細胞)間基因表達的差異。與W細胞相比，有些基因在AS細胞的表達增強，有些則減弱。BCSC-1基因(又稱LOH11CR2A)是表達增強

2、得最高的基因。
　　 鑒于Martin等提出BCSC-1基因是1個候選腫瘤抑制基因。本實驗室研究了BCSC-1基因在人鼻咽癌的抑癌作用。前博士生陳雙玲把BCSC-1轉(zhuǎn)染入BCSC-1弱表達的野生型CNE-2L2細胞，觀察到BCSC-1基因異位表達使CNE-2L2細胞在培養(yǎng)中的生長、集落生成、細胞的成瘤性生長明顯抑制。我參與了BCSC-1基因異位表達對CNE-2L2細胞惡性行為影響的研究。但是，要證明BCSC-1基因的抑癌作用，單

3、憑基因的異位表達是不夠的，因為異位表達的基因是外源的，而非細胞自身基因的表達。因此，我用siRNA抑制BCSC-1強表達的AS細胞的BCSC-1基因表達，觀察是否發(fā)生與BCSC-1基因異位表達相反的作用，即導(dǎo)致AS細胞惡性行為增強。我確實觀察到了AS細胞在培養(yǎng)中的生長、集落生成、細胞的成瘤性生長等惡性行為增強的現(xiàn)象。在此基礎(chǔ)上，我還用裸鼠做了BCSC-1基因治療CNE-2L2細胞所長腫瘤的實驗研究，進一步證明了BCSC-1基因?qū)NE-

4、2L2細胞惡性生物學(xué)行為的抑制作用。這樣，我的實驗與陳雙玲的實驗一起，證明了BCSC-1基因在人鼻咽癌細胞CNE-2L2確起著抑癌基因的作用。
　　 為從蛋白質(zhì)水平檢測BCSC-1基因在人鼻咽癌組織的表達，制備了1個能用于免疫組化檢測的抗BCSC-1蛋白質(zhì)的單克隆抗體。用此抗體作探針，在蛋白質(zhì)水平檢測了3例正常鼻咽組織和9例鼻咽癌活檢組織的BCSC-1基因表達，見BCSC-1基因在所檢測的正常鼻咽上皮細胞有強表達，而在9例人鼻咽

5、癌組織中有4例的表達明顯減弱，占44.4％。為探討B(tài)CSC-1基因抑癌作用的分子機制，另外，我從3個方面作了初步探索：1)用全基因組芯片分析了BCSC-1基因異位表達對CNE-2L2細胞基因表達的影響，觀測到有91個基因表達增強，有97個基因表達減弱。我對這些基因作了GO分析和Pathway分析；2)用microRNA芯片BCSC-1基因異位表達對CNE-2L2細胞microRNA表達的影響；3)用RT-PCR檢測了BCSC-1基因經(jīng)s